[发明专利]蛋白质诱导的多能细胞技术及其用途

权利要求书

1.一种通过下述生成蛋白质诱导的多能干(piPS)细胞的方法：

使用QQ-蛋白质转导技术将细菌表达的重编程蛋白质递送到起始体细胞的核内；

重复几次细胞重编程循环用于产生重编程蛋白质诱导的多能干细胞；

将所述重编程的细胞移动到无饲养者培养基内用于扩增；和

扩增且传代全皿中的所述重编程的细胞用于生成同质piPS细胞，导致从起始体细胞到蛋白质诱导的多能干细胞的80％至91％的转换效率。

2.根据权利要求1的方法，其进一步包括使用细菌表达系统产生重编程蛋白质。

3.根据权利要求2的方法，其进一步包括使用QQ-试剂修饰所述重编程蛋白质。

4.根据权利要求3的方法，其进一步包括在所述修饰步骤前，用小分子荧光探针体外标记所述重编程蛋白质的步骤。

5.根据权利要求4的方法，其进一步包括监控QQ-蛋白质递送进入所述起始体细胞的核内的效率。

6.根据权利要求1的方法，其提供一般的蛋白质诱导的细胞重编程方法，用于经由转分化由健康和患病动物和人体细胞生成piPS细胞、特定成体干细胞、特定祖细胞和不同体细胞类型，当生成特定成体干细胞、特定祖细胞和不同体细胞类型时，必须使用不同蛋白质混合物。

7.根据权利要求1的方法，用于在允许直接使用所述细菌表达的细胞重编程蛋白质用于动物和人体细胞的细胞重编程中使用，以生成piPS细胞。

8.根据权利要求1的方法，其中将细菌表达的重编程蛋白质递送到起始体细胞的核内包括递送：1)四种重编程蛋白质Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc的组合；2)三种重编程蛋白质Oct4、Sox2和Klf4的组合，或三种重编程蛋白质Sox2、Oct4和Nanog的组合；3)两种重编程蛋白质Oct4和Sox2的组合，或两种重编程蛋白质Oct4和Nanog的组合；或4)仅一种重编程蛋白质Oct4或Nanog。