[发明专利]疏水性制剂

说明书

本发明涉及物质在通常不会溶解所述物质的疏水性溶剂中的制剂，和获得这些制剂的方法。特别是，本发明涉及亲水性物种在诸如油等疏水性溶剂中的制剂。

本发明特别适用于在正常情况下不溶于油或其他疏水性溶剂的亲水性大分子。

对于多种应用，例如在药物科学、食品技术或化妆品行业中的应用，操作蛋白质或类似的大分子时会带来问题，这是因为它们的亲水性和高度的极性限制了它们与脂相的相互作用程度或并入脂相的程度。许多天然系统采取脂质屏障(例如，皮肤、细胞膜)来防止亲水性分子与内部区室接触；将蛋白质分散在脂质载剂中的能力将开启将这些大分子引入生物系统的新途径，由此可以使含有蛋白质的脂质介质与屏障的疏水性成分整合，而不是被其排斥。

将蛋白质并入油中可带来益处的另一方面是酶在有机相中的应用。与化学方法相比，酶合成正变得越来越重要，这是因为其低得多的能量需求、更大的底物和产物特异性、高产率和使不可能以化学方式催化的许多反应得到了催化。最近关于酶可以在有机环境中保持活性的发现开启了很多新的可能性。因此，涉及亲脂性底物和产物的反应可以得到有效催化，并且酶稳定性通常比在水性环境中高得多，使其可用于极端得多的条件中，例如高温。一个非常重要的方面是，涉及到诸如脂肪酶和肽酶等水解酶的反应在低水环境中能够优先逆向进行，因此能够合成多种工业上重要的化合物。另一应用是涉及到复杂反应链的情况，其中多个催化单元需要保持相互接近。这可以是光引发的氧化还原反应的情况。另一可能性是利用酶作用于有机金属底物以引起矿化从而以受控方式在油相中产生纳米颗粒。制备预先形成的纳米颗粒在油相中的稳定分散体还可能有利于某些表面催化的反应的进行。

亲水性物质在油相中而非在水性介质中的分散还对在温度介导的变性、水解、光敏感性等方面提高其稳定性有益。可以选择在与水溶液相比更宽的温度范围内保持流体的油或者具有更高粘度的油，从而形成抗物理损伤的更大保护。在混合相体系中，蛋白质在油中的包封可限制其与水溶性化合物之间的对彼此有害的相互作用，例如氧化。

本发明的组合物或制剂的另一优点在于它们基本上无水，因此对水解稳定。它们还对冷冻-解冻稳定，并在高温下具有更高的稳定性，这很可能是因为蛋白质的解折叠和变性必须要求水的存在。这意味着可以预期所述组合物或制剂与亲水性物质的水性制剂相比具有长得多的保存期。另外，因为这些制剂是无水的，它们与制药实践中的胶囊相容性更好，在制药实践中，明胶和羟丙基甲基纤维素(HPMC)胶囊壳可吸收水分并因此软化。

此类物质在不相容相中的溶解可通将其包裹在两亲物外鞘中来实现，所述两亲物与所要溶解的物质以及连续相均相容。这种方法在专利申请WO96/014871中已有所描述，其中，将片层形成性两亲物(例如磷脂)分散在水相中，从而形成小的单片层囊泡(SUV脂质体)，然后将其与大分子混合，之后通过冻干除去水，随后加入疏水性(油)相。已经提出，在添加油的过程中，脂质体膜相互融合并形成完全包围大分子的连续扩展的单片层或多片层膜(两亲物外鞘)。

不过，该方法具有较大的局限性，这是因为实现完全溶解(利用可见光散射的缺失来确定完全溶解)所需的两亲物与溶质的比例(重量/重量)较高。在诸如油酸等油中，两亲物/溶质比通常≥7，而甘油三脂需要为溶质的15至20倍的两亲物来实现令人满意的溶解，在矿物油的情况下，高浓度的大分子的有效溶解通常不能实现。由于两亲物本身在甘油三脂和其它油相中的溶解性有限，这给可容纳于油相中的溶质的最大总量带来了较大限制——通常小于5mg/ml。此外，当将这些油相分散在水相中形成乳液时，其中增溶的分子在正常情况下容易释放到水相中，从而损失了30%至70%的大分子。

现在已经发现，可以以比WO96/014871公开的方式更有效的方式将大分子封装在两亲物外鞘中。这通过以下方式来实现：首先将两亲物溶解在有机相(例如环己烷)中，然后将溶解在水相中的大分子的溶液分散在上述环己烷中以形成油包水乳液。通过这种方式，大分子被单层的两亲物包围，而非WO96/014871所述的多层包围。不过，令人惊讶地发现，为了实施这一方法，使用单一两亲物(例如大豆磷脂酰胆碱)并不够，并且该方法仅在采用特定比例的两亲物的特定组合时才有效。因此，本领域技术人员单纯基于WO96/014871的教导不能获得本发明。