[发明专利]在肺动脉高血压的治疗中调控MICRORNA的方法

说明书

发明领域

本发明涉及肺动脉高血压的治疗和预防，即施用调控一种microRNA(miRNA)的活性或表达的药剂。具体地，本发明提供用于治疗或预防肺动脉高血压的方法，即抑制有此需要的受试者的细胞中miR-145的表达或活性。 

发明背景 

肺动脉高血压(PAH)是肺小动脉(PA)的一种疾病，其特征在于PA压和血管重塑的增加，从而导致肺血管阻力的进行性增加(Rich等,1987)。血管闭合(obliteration)的后果是右心衰竭和高死亡率(Jeffery等,2002;Voelkel等,1997)。在约70%的患有可遗传形式的PAH(hPAH)的患者中已鉴定出编码骨形态发生蛋白(BMP)2型受体(BMPR2)(一种针对转化生长因子(TGF)-β超家族的受体)的基因中的种系突变(Morrell等,2001)。而且，在缺乏此基因中突变的情况下，PAH病例中BMPR2表达也显著降低(先天性PAH，iPAH)，表明此受体途径在PAH形成中的更广泛的作用。在肺动脉平滑肌细胞(PASMC)中，BMPR2中的突变与对BMP和TGF-β的异常生长应答有关。在内皮细胞中，这些突变增加了细胞对凋亡的易感性(PAEC)(Morrell等,2001)。在一些家族中和大多数iPAH病例中不存在BMPR2突变表明，仍然需要鉴定出另外的、可能与TGF-β超家族有关的病理学机制。 

对于所有PAH形式来说共同的一个主要的组织病理学特征是表达平滑肌特异性α-肌动蛋白(SMA)的细胞在周围肺动脉中的积累。这包括SMA阳性细胞在新内膜(neointima)中的出现和SMA阳性细胞到正常没有平滑肌的前毛细管肺微动脉中的扩张(Mandegar等,2004)。负责PA的该远端部分的肌肉化(muscularization)的细胞过程尚不清楚，但这些观察表明PASMC在PAH形成中的重要作用。 

MicroRNA(miRNA)是一类小的内源性非编码RNA，其能够通过靶向特定的信使RNA(mRNA)并诱导它们的降解或翻译抑制来负性调节基因表达(Ambros,2004;Bartel,2009)。最近的研究已将mRNA降解定义为 miRNA:mRNA靶物的主要机制性作用(Guo等,2010)。数项最近的研究评估了miRNA在血管炎症中以及血管病理形成中的直接作用(Kartha和Subramanian,2010;Urbich等,2008)。在一项最近的研究中，显示miR-145在血管壁中丰富表达(Cheng等,2009)。MiR-145被转录为编码人5号染色体上(Lio等,2010)和小鼠18号染色体上的miR-143和miR-145两者的长初始miRNA(pri-miRNA)，其受到保守SRF结合位点的调节(Xin等,2009)。miR-145到血管壁的定位显示在平滑肌层中相比于外膜(adventitial)成纤维细胞和内皮细胞的高表达(Cheng等,2009)。因此，miR-145被视为一种平滑肌细胞表型标志物和调控物，它能够经由它的靶基因KLF-5及其下游信号分子心肌蛋白(myocardin)调节平滑肌细胞(SMC)成熟和增殖，以及血管新内膜损伤形成(Cheng等,2009;Elia等,2009)。已显示TGF-β超家族中的激动剂经由Smad依赖性途径激活miR-143/145簇(Davis-Dusenbery等,2011;Long等,2011)。而且，对miR-145、miR-143和miR-143/145敲除(ko,-/-)小鼠的分析显示主动脉和其它周围动脉的明显更薄的平滑肌层，这是由于肌动蛋白丝的破坏诱导降低的SMC大小(Elia等,2009)。这导致miR-145-/-小鼠中应答损伤产生中度系统性低血压和缺乏新内膜形成(Xin等,2009)。而且，从单ko和双ko动物分离的血管平滑肌细胞(VSMC)显示高增殖活性和更高的向源自血小板的生长因子(PDGF，VSMC的一种已知的化学引诱剂)迁移的能力(Elia等,2009;Xin等,2009)。此外，对miR-143(145)ko小鼠血管系统的药理学分析揭示了对血管加压(vasopressive)刺激的减弱应答(Elia等,2009;Xin等,2009)。总之，这些发现显示VSMC在miR-145ko和miR-143/145双ko小鼠中的去分化表型。