[发明专利]PRAME纯化

权利要求书

1.减少蛋白在从稀释剂A至稀释剂B的稀释剂交换过程中的聚集的方法，其包括：

(i) 在所述交换前或者在所述交换的同时向稀释剂A加入聚阴离子化合物；和

(ii) 将蛋白从稀释剂A交换至稀释剂B，

其中所述蛋白为PRAME。

2.聚阴离子组合物用于减少蛋白在从稀释剂A至稀释剂B的稀释剂交换过程中的聚集的用途，其中所述蛋白为PRAME。

3.权利要求1或2的方法或用途，其中在所述稀释剂交换前加入所述聚阴离子化合物。

4.前述权利要求中任一项的方法或用途，其中稀释剂A包含去污剂。

5.权利要求4的方法或用途，其中所述去污剂是阴离子去污剂。

6.权利要求5的方法或用途，其中所述去污剂选自：SDS、多库酯钠和十二烷基肌氨酸钠。

7.前述权利要求中任一项的方法或用途，其中稀释剂B基本上不含去污剂。

8.前述权利要求中任一项的方法或用途，其中稀释剂B包含pH 9.8的5.0 mM硼酸盐、蔗糖3.15% w/v。

9.前述权利要求中任一项的方法或用途，其中所述蛋白包含His标签。

10.前述权利要求中任一项的方法或用途，其中所述聚阴离子化合物具有至少8个的净负电荷。

11.前述权利要求中任一项的方法或用途，其中所述聚阴离子化合物为寡核苷酸。

12.权利要求11的方法或用途，其中所述寡核苷酸的长度为5-200个核苷酸。

13.权利要求11或12的方法或用途，其中所述寡核苷酸包含CpG。

14.权利要求13的方法或用途，其中所述寡核苷酸选自：

。

15.前述权利要求中任一项的方法或用途，其中所述稀释剂交换通过透析或渗滤实现。

16.前述权利要求中任一项的方法或用途，其中所述方法进一步包括步骤(iii)：将所述蛋白配制到稀释剂C中。

17.权利要求16的方法或用途，其中所述稀释剂C包含Tris、蔗糖、硼酸盐、泊洛沙姆和CpG。

18.包含PRAME的组合物，其通过权利要求16-17中任一项的方法生产。

19.包含PRAME和寡核苷酸的组合物，其中PRAME具有10-30nm之间的颗粒大小。

20.权利要求19的组合物，其中PRAME具有15-25nm之间的颗粒大小。

21.权利要求19-20中任一项的组合物，其中所述颗粒大小通过动态光散射测定。

22.用于生产药学上可接受的PRAME组合物的方法，其包括步骤：

(a) 根据权利要求1、3-13中任一项的方法进行稀释剂交换；和

(b) 将步骤(a)中产生的制剂灭菌。

23.权利要求22的方法，其包括额外步骤(b')：在步骤(b)之前将所述蛋白配制到稀释剂C中。

24.权利要求22或23的方法，其包括额外步骤(c)：将步骤(b)中产生的制剂冷冻干燥。

25.权利要求22-24中任一项的方法，其中所述灭菌通过过滤实现。

26.用于生产药学上可接受的PRAME组合物的方法，其包括步骤：

(a) 进行PRAME从稀释剂A至稀释剂B的稀释剂交换，其中在所述稀释剂交换前或者在所述稀释剂交换过程中将聚阴离子化合物加入到稀释剂A或稀释剂B中；和

(b) 获得包含PRAME的稀释剂B。

27.权利要求26的方法，其包括额外步骤(c)，其选自：

(i) 将所述包含PRAME的稀释剂B灭菌；和

(ii) 首先将所述包含PRAME的稀释剂B配制成包含PRAME的稀释剂C，并且随后将所述包含PRAME的稀释剂C灭菌。

28.权利要求26或27的方法，其包括将所述PRAME组合物冷冻干燥的额外步骤。