[发明专利]石棉检测方法有效
申请号: | 201280039165.9 | 申请日: | 2012-08-09 |
公开(公告)号: | CN103733048A | 公开(公告)日: | 2014-04-16 |
发明(设计)人: | 黑田章夫;石田丈典;西村智基 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人广岛大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/27;G01N21/78 |
代理公司: | 北京市磐华律师事务所 11336 | 代理人: | 董巍;谢栒 |
地址: | 日本广岛县东*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 石棉 检测 方法 | ||
1.一种石棉检测方法,其特征在于,包括下述步骤:
接触步骤,使带有荧光标记的石棉结合蛋白与受检物接触;
第1检测步骤,在经过上述接触步骤后,使用相差显微镜检测上述受检物中所含的纤维状物质;以及
第2检测步骤,使用荧光显微镜检测与上述第1检测步骤中检测的上述纤维状物质结合的上述石棉结合蛋白,其中
上述第1检测步骤和上述第2检测步骤在同一视野中进行。
2.根据权利要求1所述的石棉检测方法,其特征在于:
上述受检物被捕集到滤器中,
进一步包含透明化步骤,该步骤将经过上述接触步骤后的上述滤器透明化,并且
在经过上述透明化步骤后进行上述第1检测步骤。
3.根据权利要求1或2所述的石棉检测方法,其特征在于:至少重复进行1次上述第1检测步骤和上述第2检测步骤。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的石棉检测方法,其特征在于:在上述第1检测步骤中,检测长5μm以上、宽不足3μm、且长与宽的比例为3:1以上的纤维状物质。
5.根据权利要求2~4中任一项所述的石棉检测方法,其特征在于:
上述石棉结合蛋白是经过上述透明化步骤后维持与石棉的结合的蛋白,
上述荧光标记是经过上述透明化步骤后通过荧光显微镜可以检测荧光的标记。
6.根据权利要求5所述的石棉检测方法,其特征在于:上述石棉结合蛋白是选自H-NS蛋白、DksA蛋白和GatZ蛋白的一种以上的蛋白。
7.根据权利要求5或6所述的石棉检测方法,其特征在于:上述荧光标记是选自Cy3、DyLight488、荧光素、Alexa488、ATTO488、CF488A、DyLight550和CF555的一种以上的荧光物质。
8.根据权利要求6所述的石棉检测方法,其特征在于:上述石棉结合蛋白是选自H-NS蛋白、DksA蛋白和GatZ蛋白的一种以上的蛋白的多聚体。
9.根据权利要求1~8中任一项所述的石棉检测方法,其特征在于:
在上述接触步骤中,使作为上述石棉结合蛋白的两种以上的不同的石棉结合蛋白与受检物接触,
上述两种以上的不同的石棉结合蛋白是与互不相同的种类的石棉特异性结合的蛋白,并且带有发出互不相同的波长的荧光的荧光标记。
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