[发明专利]石棉检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种石棉检测方法。

背景技术

最近，石棉（纤维状硅酸盐、也称作“石绵”）给人体带来的不良影响正成为问题。即，由企业公布了过去从事石棉的制造或使用业务的人常发生肺癌、间皮瘤等健康损害，据报道，通过吸入石棉粉尘，主要有可能发生石棉肺、肺癌、恶性间皮瘤等健康障碍。

石棉肺是肺发生纤维化的肺纤维症（尘肺）的疾病之一。引起肺纤维化的原因有其他矿物性粉尘等多种原因，但因暴露于石棉而发生的肺纤维症特别作为石棉肺来区别。石棉纤维导致的肺癌是由摄入到肺泡内的石棉纤维主要通过物理刺激而发生的。致癌性的强度根据石棉的种类而不同，此外还与石棉的粗度、长度有关。恶性间皮瘤是在包围肺的胸膜、或包围肝脏或胃等脏器的腹膜等中发生的恶性肿瘤。

石棉包括温石棉（白石棉，chrysotile）、青石棉（青石棉，crocidolite）、铁石棉（茶石棉，amosite）、直闪石（anthophyllite）、透闪石（tremolite）、阳起石（actinolite）等。作为石棉的用途，90%以上用于建材，剩下的10%用于化学工厂设备用的密封材料、摩擦材料等工业制品等。需要说明的是，自平成16（2004）年10月1日起，以石棉为原料的建材、摩擦材料、粘合剂的制造等已被禁止，但由于过去存在着大量使用石棉的原委，因此现实状况是许多建筑物中都留有石棉。

作为石棉的检测方法，例如，检查大气中的石棉时，用泵吸入大气时将石棉捕集到滤器中，使用丙酮等将该滤器无色化（透明化），之后使用相差显微镜进行观察，计测大气中的总纤维浓度。总纤维浓度为1根/L以上时，使用电子显微镜判定通过相差显微镜观察到的纤维实际上是否是石棉（参照非专利文献1）。

但是，使用相差显微镜进行观察时需要熟练的技能，还需要相当的时间，因此难以同时进行多个处理。另外，电子显微镜是非常昂贵的器械，所以并非谁都可以简便地实施。而且，利用电子显微镜进行的判定，不但需要进行样品的繁杂的预处理等，而且还要通过能量分散型X射线分析装置分析由相差显微镜观察到的纤维，是非常需要时间和耐性的作业。

因此，在现有的使用相差显微镜和电子显微镜的方法（以下，称作“相差显微镜-电子显微镜法”）中，无法快速检测石棉。因此，无法应对需要快速检测的解体现场的石棉风险。在解体现场，快的情况下用2～3天完成解体，因此检查结果出来时，往往是在石棉已经扩散到周围之后。这样，与其说日本的石棉发生源是工场，不如说已经向地点在短期内变动的解体现场转移，因此开发可以快速检测石棉的方法是当务之急。

然而，本发明人等独立发现了与石棉特异性结合的蛋白（称作“石棉结合蛋白”），并提倡利用所述蛋白的石棉的生物测定系统（称作“生物荧光法”）（例如参照专利文献1）。生物荧光法是指，通过用荧光物质修饰石棉结合蛋白，制成生物探针，使用所述生物探针在荧光显微镜下检测石棉的方法。在生物荧光法中，就连用相差显微镜非常难以看到的更微细的石棉纤维，也可以高灵敏度地检测出来。具体而言，在生物荧光法中，已知就连宽（直径）30纳米的微细的温石棉单纤维也可以检测出来。而且，在生物荧光法中，可以确认石棉纤维的理化性质和形状这两者。因此，生物荧光法作为有效率、简便且精度高的石棉检测方法而受到关注。

另外，本发明人等报道了：来自大肠杆菌（Escherichia coli）的DksA蛋白即使在石棉中也特别与温石棉（白石棉）强力结合（非专利文献2）。

而且，本发明人等还就石棉结合蛋白的筛选方法、以及使用通过该筛选方法得到的石棉结合蛋白并利用生物荧光法检测各种试样中所含的石棉的方法进行了公开（专利文献2）。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2007/055243号小册子（国际公开日：2007年5月18日）

专利文献2：日本国公开专利公报“日本特开2010-32271号（2010年2月12日公开）”

非专利文献

非专利文献1：“石棉监测手册（アスベストモニタリングマニュアル）（第4.0版）”环境省水·大气环境局大气环境课、平成22年6月

非专利文献2：“Detection of Chrysotile Asbestos by Using a Chrysotile-Binding Protein”,Biotechnology and Bioengineering,第99卷,No.2,February1,2008,第285-289页.

发明内容