[发明专利]用于化合物筛选的无细胞翻译系统和有关的用途

权利要求书

1.一种用于表达目标蛋白的无细胞系统，其中所述无细胞系统包含2％到不超过5％麦胚提取物，且进一步包含所述目标蛋白的表达所需的组分，而且其中所述系统用于检测作为所述目标蛋白之调节剂的化合物，对于否则在更高的麦胚浓度下不可检测到的化合物具有增加的检测灵敏度，其中所述目标蛋白是病毒蛋白。

2.根据权利要求1所述的无细胞系统，其中所述病毒蛋白是病毒衣壳蛋白。

3.根据权利要求1所述的无细胞系统，其中所述目标蛋白是衣壳相互作用蛋白。

4.根据权利要求1所述的无细胞系统，其中所述病毒蛋白由病毒表达，所述病毒是选自以下组的病毒科的成员：黄病毒科、披膜病毒科、布尼安病毒科、沙粒病毒科、纤丝病毒科、痘病毒科、正粘病毒科、弹状病毒科、疱疹病毒科、冠状病毒科、副粘病毒科、嗜肝病毒科、博尔纳病毒科、细小RNA病毒科、逆转录病毒科、呼肠孤病毒科、乳头状瘤病毒科、腺病毒科、星状病毒科、多瘤病毒科、环病毒科、细小DNA病毒科和嵌杯病毒科。

5.根据权利要求1所述的无细胞系统，其中所述组分包含选自以下的成员：缓冲液、氨基酸、核酸转录物和它们的组合，其中所述核酸转录物编码病毒蛋白。

6.根据权利要求5所述的无细胞系统，其中所述组分进一步包含选自以下的成员：可检测的部分、ATP、GTP、磷酸肌酸、标记的氨基酸、肉豆蔻酰辅酶A锂盐、RNA酶抑制剂、肌酸激酶、tRNA和它们的组合。

7.根据权利要求6所述的无细胞系统，其中所述标记的氨基酸是[35S]甲硫氨酸。

8.根据权利要求5所述的无细胞系统，其中所述核酸转录物在体外转录反应中进行装配。

9.根据权利要求5所述的无细胞系统，其中所述核酸转录物编码病毒衣壳蛋白。

10.根据权利要求5所述的无细胞系统，其中所述核酸转录物编码病毒衣壳相互作用蛋白。

11.根据权利要求5所述的无细胞系统，其中所述缓冲液包含选自以下的成员：乙酸钾、精胺、二硫苏糖醇和它们的组合。

12.一种用于装配病毒衣壳的无细胞系统，其中所述无细胞系统包含2％到不超过5％麦胚提取物和表达至少一种构成所述病毒衣壳的病毒蛋白所需的组分，而且其中所述系统用于检测作为病毒衣壳装配之调节剂的化合物，对于否则在更高的麦胚浓度下不可检测到的化合物具有增加的检测灵敏度。

13.根据权利要求12所述的无细胞系统，其中所述病毒衣壳得自选自以下组的病毒科：黄病毒科、披膜病毒科、布尼安病毒科、沙粒病毒科、纤丝病毒科、痘病毒科、正粘病毒科、弹状病毒科、疱疹病毒科、冠状病毒科、副粘病毒科、嗜肝病毒科、博尔纳病毒科、细小RNA病毒科、逆转录病毒科、呼肠孤病毒科、乳头状瘤病毒科、腺病毒科、星状病毒科、多瘤病毒科、环病毒科、细小DNA病毒科、和嵌杯病毒科。

14.根据权利要求12所述的无细胞系统，其中所述组分包含缓冲液、氨基酸和编码所述病毒蛋白的核酸转录物。

15.根据权利要求14所述的无细胞系统，其中所述组分进一步包含可检测的部分、ATP、GTP、磷酸肌酸、标记的氨基酸、肉豆蔻酰辅酶A锂盐、RNA酶抑制剂、肌酸激酶和tRNA。

16.根据权利要求15所述的无细胞系统，其中所述标记的氨基酸是[35S]甲硫氨酸。

17.根据权利要求14所述的无细胞系统，其中所述核酸转录物在体外转录反应中进行装配。