[发明专利]由具有特定免疫显性表位的婴儿利什曼虫PFR1蛋白片段组成的嵌合分子可用于抗利什曼病的免疫疗法

权利要求书

1.一种用于编码婴儿利什曼虫及其片段PFR1蛋白的核苷酸序列，含有以下任一组中至少一个免疫显性表位：SEQ ID No：1、SEQ ID No：2、SEQ ID No：3、SEQ ID No：4、SEQ ID No：5、SEQ ID No：6、SEQ ID No：7和SEQ ID No：8，该免疫显性表位可以诱导动物T细胞的抗原特异性细胞毒性免疫反应，对抗引起利什曼病的动质体。

2.根据权利要求1所述的核苷酸序列，编码婴儿利什曼虫PFR1蛋白1-595氨基酸是由SEQ ID No：12决定。

3.根据权利要求1所述的核苷酸序列，编码婴儿利什曼虫PFR1蛋白160-595氨基酸是由SEQ ID No：9决定。

4.根据权利要求1所述的核苷酸序列，编码婴儿利什曼虫PFR1蛋白160-548氨基酸是由SEQ ID No：10决定。

5.根据权利要求1所述的核苷酸序列，编码婴儿利什曼虫PFR1蛋白160-385氨基酸是由SEQ ID No：11决定。

6.一种嵌合分子，包含：

(a)权利要求1-5所述的核苷酸序列，融合到：

(b)编码克氏锥虫Hsp70蛋白及其片段的核苷酸序列；

该嵌合分子可以诱导动物T细胞的抗原特异性细胞毒性免疫反应，对抗引起利什曼病的动质体。

7.根据权利要求6所述的嵌合分子，含有由SEQ ID No：13决定的编码克氏锥虫Hsp70蛋白的核苷酸序列或其片段。

8.一种重组载体，包含：

(a)权利要求1-5所述的核苷酸序列，或

(b)权利要求6-7所述的嵌合分子。

9.一种包含权利要求8所述的载体的重组质粒。

10.一种药物组合物，包含：

(a)权利要求1-5所述的核苷酸序列，或

(b)权利要求6-7所述的嵌合分子。

11.根据权利要求1-5所述的核苷酸序列的用途，用于治疗和/或预防导致动物换利什曼病的动质体感染。

12.根据权利要求11所述的权利要求1-5的核苷酸序列的用途，其中，所述动物是指人或犬。

13.根据权利要求1-5所述的核苷酸序列的用途，用于生产治疗或预防疫苗。

14.根据权利要求13所述的生产治疗或预防疫苗的方法，包含以下步骤：

(a)确定至少一种权利要求1-5所述的核苷酸序列，

(b)使用来自导致利什曼病的动质体的基因组DNA，通过PCR扩增至少一种a)中定义的核苷酸序列，以及含有限制性内切酶位点的寡核苷酸。后者的限制性内切酶位点被这些内切酶消解后，可以让扩增子直接克隆到原核和真核表达载体中，

(c)克隆至少一种在b)中扩增的核苷酸序列，用于产生由该核苷酸序列编码的蛋白，

(d)通过亲和层析法纯化至少一种在c)中获得的蛋白，和

(e)产生至少一种无内毒素的DNA载体，用于预防或治疗疫苗的安全接种。

15.根据权利要求1-5所述的核苷酸序列的用途，用于对照方法中，以测量引起动物利什曼病的动质体感染程度。

16.根据权利要求15所述的核苷酸序列的用途，其中，所述动物是指人或犬。

17.权利要求1-5所述的核苷酸序列的用途，用以生成抗导致未感染动物换利什曼病动质体感染的保护性免疫记忆。

18.根据权利要求17所述的核苷酸序列的用途，所述动物是指人或犬。

19.权利要求1-5所述的核苷酸序列的用途，用于阐明或清除感染动物组织中的部分或全部会导致利什曼病的动质体。

20.根据权利要求19所述的核苷酸序列的用途，所述动物是指人或犬。