[发明专利]由具有特定免疫显性表位的婴儿利什曼虫PFR1蛋白片段组成的嵌合分子可用于抗利什曼病的免疫疗法

说明书

技术领域

本发明属于化学和药品行业，医学、分子生物学、免疫学、寄生虫学和兽医学领域，涉及用于控制利什曼病的免疫学工具。所述疾病是由利什曼虫属中不同种类的原虫所引起。

背景技术

利什曼虫属的物种(原生动物细胞内寄生虫)属于动质体目锥虫科，分布于全球的热带和亚热带地区，会引起名叫利什曼病的广泛临床症状。根据引发疾病的物种不同，利什曼病可以分为皮肤型、皮肤粘膜型和内脏型(根据其组织嗜性和临床引起的症状)。利什曼病近年的发病率大幅上升，成为遍及全大陆88个国家的地方病，据称有3.5亿人面临感染该疾病的风险。(WHO报告，http://who.int/ctd/html/leisdis.html)。据估计，全球约有1200万人受利什曼病的影响。在每年200万的新发病例中，500,000例为内脏型利什曼虫病(VL)。该疾病是由婴儿利什曼虫和杜氏利什曼虫引起的，症状包括间歇热、贫血、脾肿大、肝肿大和淋巴结病。VL会使受影响病人的免疫力下降，引起合并感染，所以常导致死亡。近年，利什曼虫/HIV合并感染成为地中海地区国家的主要健康问题。在这些国家中，犬类是主要宿主，是人类该疾病的储主(Alvar等人.2004国际寄生虫学期刊57:1-88)。

接种疫苗是预防传染病因子引起疾病和死亡的最有效治疗方法。尽管如此，目前对抗病原体的高效疫苗非常少，其中一种疫苗能有效对抗传染病因子。近年，在不同的利什曼原虫中对多种抗原疫苗及其制品进行试验，并得出了迥然不同的结果(Kedzierski等人.2010.世界传染病杂志2(2):177-85；Kedzierski等人.2006.寄生虫学,133:87-112；Requena等人.2004.生物疗法专家评论4(9):1505-17)。但到目前为止，还没找到令人完全满意的疫苗。

对抗疾病的另一个选择是治疗药物，或在没有治疗药物时，采用化学免疫疗法。试验在含佐剂的巴氏消毒完整寄生虫(Convit等人.2003医学和卫生学97:469-72)以及寄生虫和抗原的混合物中进行(Badaro等人.2006感染性疾病杂志194:1151-9)，但和疫苗的情况相类似，试验没有取得最终的成功(El-OnJ.2009.以色列医学学会期刊11(10):623-8)。

如上文所述，犬类是该疾病的主要储主，所以也从对抗这种人畜共患病的免疫学角度出发，做出了一些尝试。事实上，利什曼病对犬类来说是严重的寄生虫病。最常见的临床症状是脱毛，特别是眼睛、耳朵和鼻子周围的毛。当疾病进一步恶化时，狗没有食欲且体重下降，且皮肤通常会出现伤口，特别是头部和腿部，并出现肾衰竭的相关症状。该疾病是西班牙大部分地区以及地中海地区绝大部分国家的地方病。

和在人类中的情况相似，人们为控制该疾病做出了多方面的尝试，但迄今为止还未得到完全令人满意的成功(Alvar等人.2004.国际寄生虫学期刊57:1-88；Reis等人.2010寄生虫学趋势26(7):341-9).

无论是人类还是犬利什曼病，最具有潜力的控制方法之一都指向使用DNA疫苗。该疫苗携带多个编码特定利什曼虫抗原或含不同寄生虫抗原的嵌合重组蛋白的基因(De Oliveira等人.2009国际寄生物学58(4):319-24；Palatnik-de-Sousa,2008.疫苗26:1709-1724).