[发明专利]检测生物分子的方法

权利要求书

1.检测存在于复杂生物样品中生物分子的方法，其包括步骤：

a）根据所述生物分子的至少一种物理性质将所述生物样品分离成多个级分；和

b）使用至少一种基于固相的免疫学检测方法特异性检测存在于级分中的生物分子，其涉及将来自各个级分的生物分子固定到对于每个级分是特异的并且彼此可区分的微球群体上；将来自一些或所有级分的所述生物分子包被的微球混合在一起以形成预混物；所述预混物被分成等分试样；并且特定结合分子被添加到至少一个等分试样，其中所述结合分子设计以发射可检测的信号。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述结合分子设计以发射光学可检测的信号。

3.根据权利要求1的方法，其特征在于，在步骤a）中，所述生物样品通过凝胶电泳分离。

4.根据权利要求3的方法，其特征在于，在步骤a）中，所获得的带模式转移到基质上。

5.根据权利要求4的方法，其特征在于转移到基质上的所述分离的生物分子进行了修饰以用于结合支持物分子。

6.根据权利要求4的方法，其特征在于转移到基质上的所述分离的生物分子经过生物素化以用于结合为亲和素或链霉亲和素的支持物分子。

7.根据权利要求4-6任何一项的方法，其特征在于，在步骤a）中，所述基质机械划分成小的区段，并且生物分子此后从各个区段上洗脱到相应级分中。

8.根据权利要求7的方法，其特征在于所述基质被切成至少一个列，并且所述至少一个列被切成多个条，并且所述生物分子此后从各个条上洗脱到相应级分中。

9.根据权利要求8的方法，其特征在于所述至少一个列被切成至少10个条。

10.根据权利要求8的方法，其特征在于所述至少一个列被切成20-200个条。

11.根据权利要求1-6任一项的方法，其特征在于，在步骤a）中来自一些或所有级分的生物分子被进一步处理，使得每个处理过的级分至少产生在第一组级分中的一个级分，和在第二组级分中的一个级分，在第一和第二组级分中的生物分子根据翻译后蛋白修饰而不同。

12.根据权利要求11的方法，其特征在于所述处理包括在第一组的级分中显示一种类型的翻译后修饰的生物分子的富集。

13.根据权利要求11的方法，其特征在于所述处理包括在第一组的级分中显示一种类型的翻译后修饰的生物分子的富集以及在第二组的级分中显示所述一种类型的翻译后修饰的生物分子的缺失。

14.根据权利要求1-6任一项的方法，其特征在于，在步骤b）中，所述特定结合分子为抗体。

15.根据权利要求1-6任一项的方法，其特征在于，在步骤b）中，对于来自等分试样的生物分子确定可检测的信号的强度，并且根据微球群体分开地确定。

16.根据权利要求1-6任一项的方法，其特征在于，在步骤a）中，所述生物分子在电泳分离前被变性。

17.根据权利要求1-6任一项的方法，其特征在于，所述生物分子是蛋白。

18.根据权利要求17的方法，其特征在于，在步骤a）中，所述生物样品在分离前预处理以降解所述蛋白成肽片段，并且在步骤b）中，所述肽片段被检测。