[发明专利]重组人NAGLU蛋白质及其用途

权利要求书

1.一种包含含有SEQ ID NO:1的氨基酸序列24-743的重组人N-乙酰基-α-D-氨基葡萄糖苷酶(rhNaGlu)的分离混合物的组合物，其中所述混合物中至少10%的所述rhNaGlu包含至少一个具有甘露糖-6-磷酸(M6P)的聚糖结构。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中具有M6P的所述rhNaGlu能够被吸收到缺乏NaGlu的哺乳动物细胞中，以致内化的rhNaGlu恢复了在相同类型的野生型哺乳动物细胞中观察到的正常NaGlu活性的至少50%。

3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述聚糖结构为N-连接聚糖。

4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述rhNaGlu含有每摩尔蛋白质至少1摩尔的M6P。

5.根据权利要求3所述的组合物，其中所述rhNaGlu含有介于每摩尔蛋白质约1和约6摩尔之间的M6P。

6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述rhNaGlu含有每摩尔蛋白质约2摩尔的M6P。

7.根据权利要求5所述的组合物，其中所述rhNaGlu含有每摩尔蛋白质约3摩尔的M6P。

8.根据权利要求5所述的组合物，其中所述rhNaGlu含有每摩尔蛋白质约4摩尔的M6P。

9.根据权利要求5所述的组合物，其中所述rhNaGlu含有每摩尔蛋白质约5摩尔的M6P。

10.根据权利要求5所述的组合物，其中所述rhNaGlu含有每摩尔蛋白质约6摩尔的M6P。

11.根据权利要求2所述的组合物，其中缺乏NaGlu的所述哺乳动物细胞为人细胞。

12.根据权利要求11所述的组合物，其中缺乏NaGlu的所述人细胞为皮肤成纤维细胞、肝细胞或巨噬细胞。

13.根据权利要求11所述的组合物，其中缺乏NaGlu的所述人细胞为神经元细胞。

14.根据权利要求13所述的组合物，其中当全身施用时，所述rhNaGlu被有效递送到有NaGlu缺乏症的哺乳动物的脑部。

15.根据权利要求14所述的组合物，其中当静脉内施用时，所述rhNaGlu被有效递送到有NaGlu缺乏症的哺乳动物的脑部。

16.根据权利要求13所述的组合物，其中当鞘内施用时，所述rhNaGlu被有效递送到有NaGlu缺乏症的哺乳动物的脑部。

17.根据权利要求2所述的组合物，其中具有M6P的所述rhNaGlu被NaGlu缺乏型细胞内化并且恢复了体内正常NaGlu活性的至少100%。

18.根据权利要求2所述的组合物，其中具有M6P的所述rhNaGlu含有每摩尔蛋白质至少25摩尔的甘露糖。

19.根据权利要求1所述的组合物，其中所述混合物中至少20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或95%的所述rhNaGlu含有M6P。

20.根据权利要求19所述的组合物，其中所述混合物中至少20%的所述rhNaGlu含有至少一个M6P。

21.根据权利要求20所述的组合物，其中所述混合物中至少30%的所述rhNaGlu含有至少一个M6P。

22.根据权利要求21所述的组合物，其中所述混合物中至少40%的所述rhNaGlu含有至少一个M6P。

23.根据权利要求22所述的组合物，其中所述混合物中至少50%的所述rhNaGlu含有至少一个M6P。

24.根据权利要求23所述的组合物，其中所述混合物中至少60%的所述rhNaGlu含有至少一个M6P。