[发明专利]用于控制病原体的氨基酸序列

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术学领域，具体地涉及抗微生物肽的获得以及它们用于控制病原体的用途。当应用抗微生物肽时，它们有效地实现了由病原体引起的疾病的控制。此外，这些肽有助于增强由包含在疫苗中的各种抗原诱导的免疫应答。

现有技术

鱼具有用作抗广谱病原体的一线防御的强大的先天免疫系统(Subramanian等人(2008)Fish and Shellfish Immunol.25:625–632)，和发育不良的适应性免疫系统(Magnadottir,(2010)Mar Biotechnol.12:361–379)。鱼抵抗病原体的方式之一是通过分泌抗微生物肽(AMP)作为先天防御机制。AMP在先天免疫系统中具有重大作用并且保护免受多种细菌、真菌、病毒和引起感染的其它病原体的侵害(Solomon,(2008)Lancet Neurol.7:116–118)。一般地，AMP被分泌在唾液、粘液、循环系统和作为病原体的靶的其它区域中(Noga等人(2010)Comp Biochem Physiol D：Genom Proteom.6:44-54)。

AMP基于它们的氨基酸组成和结构被分成5类。在这些分类中，包括阴离子肽，具有α-螺旋两亲结构的线性肽，富含特定氨基酸的阳离子肽，肽片段和具有形成分子内键的半胱氨酸的肽(Brogden(2005)Nat Rev Microbiol.3:238–50;Boman(2000)Immunol Rev.173:5-16)。阴离子肽以毫摩尔浓度产生，需要锌作为辅因子，并且显示抗革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌的抗微生物活性。具有两亲性α-螺旋结构的线性和阳离子肽具有少于40个氨基酸并且具有在中间部分具有铰链区的三维结构。虽然其结构在溶液中是无序的，但当它们与膜接触时，这些分子采取二级α-螺旋结构(Brogden(2005)Nat Rev Microbiol.3:238-50)。由富含特定氨基酸的线性阳离子肽组成的其它组不具有半胱氨酸残基，从而这些肽在溶液中具有非常柔软的结构(Brogden(2005)Nat Rev Microbiol.3:238–50)。第4组包括带电荷的肽，其是来自更大的蛋白质的片段。这些肽具有抗微生物活性和与其它组的肽相似的结构(Bellamy等人(1992)J Appl Bacteriol.73:472-9;Zanetti等人(1995)FEBS Lett.374:1-5)。第5组肽由约380个成员组成，所述成员包含形成分子内键的6个保守半胱氨酸残基和β片结构(Brogden(2005)Nat Rev Microbiol.3:238-50)。该组包括防御素和海帕西啶(Boman等人(2000)Immunol Rev.173:5-16)。

虽然AMP通常通过结构特征的差异来分类，但存在一些对于这些肽中的大部分肽是共同的特征。例如，它们通常具有少于60个氨基酸，在生理条件下具有广谱抗微生物活性，以及具有正电荷(Zasloff(2002)Nature415:389-395)。大多数两亲性AMP，基于其与病原体例如细菌和有包膜病毒的脂质细胞膜的相互作用，采取促成这些肽的作用机制的结构(Shai(2002)Biopolymers66：236-48;Jelinek和Kolusheva(2005)Curr.Protein Pept.Sci.6：103-14)。该相互作用引起病原体脂质膜的快速去稳定/透化。几个观察表明除了孔形成的机制以外，AMP还可抑制细胞壁、核酸和蛋白质的合成，以及甚至抑制酶活性(Brogden等人(2005)Nat.Immunol.6：558-64;Campagna等人(2007)Biochemistry46：1771-8)。

由于微生物发展抗抗生素抗性的能力以及由病原体引起的对于其还没有适当治疗的疾病的存在，需要寻找具有抗微生物活性的新型分子。

因此，要解决的重要问题是开发能够高效地控制广泛病原体并且对先天和适应性免疫、人和兽医学包括水产业的极其重要的方面具有影响的新型抗微生物产品，特别是蛋白质和/或肽。

发明详述

本发明通过提供用于控制和治疗由病原体产生的感染，包括由细菌、病毒或真菌引起的感染的新型替代物解决了上述问题。在本发明中，首次报道了SEQ ID No.1、2和3的抗微生物肽。本发明的目的还有在它们的氨基酸序列中包含SEQ ID No.1、2或3的氨基酸序列或与SEQID No.1、2或3的肽具有至少80%的同一性的氨基酸序列的氨基酸序列。