[发明专利]核酸扩增方法、核酸基板、核酸分析方法及核酸分析装置

权利要求书

1.一种核酸扩增方法，其特征在于，包含如下工序：在基体的表面配置固定有第一核酸的区域和未固定所述第一核酸的区域的工序；将同一链上具有至少两个以上作为解析对象的碱基序列的第二核酸固定在固定有所述第一核酸的区域上的工序；以及进行所述第二核酸的扩增反应的工序。

2.一种核酸扩增方法，其特征在于，包含如下工序：在基体的表面配置固定有第一核酸的区域和未固定所述第一核酸的区域的工序；将同一链上具有至少两个以上作为解析对象的碱基序列的第二核酸固定在固定有所述第一核酸的区域上的工序；以及供给第三核酸并以所述第一核酸及第三核酸为引物进行所述第二核酸的扩增反应的工序。

3.根据权利要求1所述的核酸扩增方法，其特征在于，第二核酸的直径的平均值大于固定有第一核酸的区域的直径的平均值的1/2。

4.根据权利要求1所述的核酸扩增方法，其特征在于，第二核酸为单链，且具有自退火结构。

5.根据权利要求1所述的核酸扩增方法，其特征在于，包含在扩增反应后去除第一核酸的延伸反应产物的互补链的工序。

6.根据权利要求1所述的核酸扩增方法，其特征在于，第二核酸是以具有解析对象碱基序列的环状核酸为模板，在具有链置换活性的聚合酶作用下获得的链置换延伸反应产物。

7.根据权利要求1所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述扩增反应为恒温反应。

8.根据权利要求1所述的核酸扩增方法，其特征在于，固定有所述第一核酸的区域的直径的平均值为500nm以下，且各固定区域中所述第一核酸的分子数的平均值为10,000分子以上。

9.根据权利要求1所述的核酸扩增方法，其特征在于，固定有所述第一核酸的各个区域中，所述第一核酸的固定密度为10,000分子/μm²以上。

10.根据权利要求9所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述固定密度为100,000分子/μm²以上。

11.根据权利要求1所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述扩增反应的反应温度为50℃～70℃之间的温度。

12.根据权利要求1所述的核酸扩增方法，其特征在于，所述第二核酸是采用滚环扩增(RCA)反应合成的大体积核酸。

13.一种核酸分析方法，其特征在于，具有在进行权利要求1～12中任一项所述的核酸扩增方法之后，进行导入带荧光标记碱基的延伸反应的单元和对所述荧光标记进行荧光检测的单元。

14.一种核酸基板，在基体上固定有包含作为解析对象的碱基序列的核酸，其特征在于，固定有所述核酸的区域的直径的平均值为500nm以下，且所述核酸的固定区域中的核酸的分子数的平均值为10,000分子以上。

15.一种核酸基板，其具有至少一个以上的流路，用于进行权利要求1所述的核酸扩增方法。

16.一种核酸分析装置，其具有至少一个温度调节装置和送液机构，用于进行权利要求1所述的核酸扩增方法。