[发明专利]大肠杆菌疫苗组合

说明书

技术领域

本发明一般涉及针对大肠杆菌(E.coli)免疫和大肠杆菌疫苗的领域。本发明更特定涉及用于制备预防性和治疗性疫苗组合的多肽组合，所述组合用于针对致病性大肠杆菌致病型进行免疫。特别地，本发明涉及用于保护人抵御广谱大肠杆菌菌株的疫苗。

发明背景

本申请引用数种出版物和专利文献以更充分描述本发明所属领域状态。各出版物的公开内容通过引用纳入本文。

大肠杆菌(Escherichia coli)是人胃肠道的常见移生菌，且尽管大肠杆菌株大多被视作共生体，一些分离物仍具有引起疾病的可能。根据是否引起肠道或肠外感染来识别2种不同的致病性大肠杆菌类型。肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)组包括引起尿道感染(UPEC)、新生儿脑膜炎(NMEC)和败血症的人致病性菌株。而其它ExPEC菌株是禽类致病性(APEC)。肠道致病性大肠杆菌(InPEC)组包括许多致病型，如产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠侵袭性大肠杆菌、粘附侵袭性大肠杆菌，和弥散粘附性大肠杆菌，这些均导致人肠道感染。这些大肠杆菌致病菌株是细菌感染的最常见病因，所述细菌感染带来导致全世界每年200万人死亡的经常性全球威胁。

接种疫苗毫无疑问是针对致病性大肠杆菌株所引起发病和死亡的最经济有效的预防性措施。然而，初步研究聚焦于鉴定用于针对个体致病类型提供保护的疫苗候选物，例如针对单独UPEC或单独NMEC。在基于比较基因组分析和采用3种ExPEC菌株(IHE3034、CFT073和536)完整基因组序列的早期出版物中，发明人鉴定了9种能保护性抵御败血症的可能候选疫苗(PNAS2010；107:20,9072-9077页)。

尽管针对个体疾病或病症应用的疫苗是有效的，仍需要提供在动物特别是人中产生保护性免疫的广谱疫苗，用于针对所有或大部分大肠杆菌引起的感染。例如，一旦接种疫苗，个体可被掩护或保护以抵御所有或很高比例的大肠杆菌可导致的疾病。由于抗生素耐药性细菌(CTX-Mβ-内酰胺酶和碳青霉烯酶)整体上在医院和社区的传播，广泛保护性疫苗将具有更多益处。然而，开发这种“通用”或“泛大肠杆菌(pan E.coli)”疫苗具有挑战性，因为需要针对通常不作为共生菌群部分的大肠杆菌株亚型进行选择性防护。因此，需要改良的大肠杆菌疫苗，包括需要从粗细胞裂解物移出并趋向更清楚定义的分子，并且需要鉴定适合纳入“通用”疫苗的抗原，特别是在临床相关菌株中普遍而在共生菌株中未发现的抗原。

另外，出于以下原因优选无针或粘膜给予的疫苗：提高的患者舒适度与给药简便性，以及减少污染风险和其它副作用，同时促进患者依从性且增加疫苗接种安全性。

本发明人发现了适用于制备针对致病性大肠杆菌株的广谱疫苗的抗原组合。令人吃惊地，所述疫苗组合提供抵御来自ExPEC和InPEC组的致病性大肠杆菌株引起的疾病/病症的保护。

发明概述

第一方面，本发明提供包含以下组合的免疫原性组合物：(i)具有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的细菌Ig样结构域蛋白片段(orf405B)或与其具有至少80％相似性的蛋白质，和(ii)具有SEQ ID NO:8所示氨基酸序列的推定脂蛋白(orf3526)或与其具有至少80％相似性的蛋白质。

在某些实施方式中，所述免疫原性组合物还包含(iii)具有SEQ ID NO:4所示氨基酸序列的upec1232或与其具有至少80％相似性的蛋白质。

在其它实施方式中，所述免疫原性组合物还包含(iv)具有SEQ ID NO:30所示氨基酸序列的gspK(orf3515)或与其具有至少80％相似性的蛋白质。

在其它实施方式中，所述免疫原性组合物还包含至少一种细菌毒素。具体而言，所述细菌毒素是大肠杆菌毒素。更具体地，所述细菌毒素是经修饰的大肠杆菌不耐热毒素(LTK63)，然而更具体地是脱毒的大肠杆菌不耐热毒素(LTK63)。

本发明组合物的蛋白质组分可以是本文所述蛋白质或氨基酸序列的片段。