[发明专利]选择性量化A-β聚集体的方法

权利要求书

1.一种选择性量化和/或表征A-β聚集体的方法，包括下列步骤：

a)将待测样品施加于基材上，

b)加入用于检测的经标记的探针，其通过特异性结合A-β聚集体标记这些A-β聚集体和

c)检测标记的A-β聚集体，其中

步骤a)可在步骤b)之前实施。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于，在步骤a)之前将捕获分子固定在基材上。

3.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，进行样品的预处理。

4.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，使用玻璃基材。

5.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，基材具有亲水性涂层。

6.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，基材用右旋糖酐涂覆。

7.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，所述捕获分子与基材或与涂层共价结合。

8.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，所述捕获分子用荧光染料标记。

9.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，所述捕获分子为抗A-β抗体。

10.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，所述抗A-β抗体特异性结合A-β聚集体的表位。

11.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，使用A-β肽-特异性探针。

12.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，所述探针为荧光染料-标记的抗A-β抗体。

13.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，使用两种或两种以上不同的探针。

14.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，使用两种或两种以上具有不同标记的荧光染料的探针。

15.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，至少一种探针为特异性结合A-β肽的N端表位的抗A-β抗体。

16.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，检测通过空间分辨荧光显微术进行。

17.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，检测通过共聚焦荧光显微术、荧光相关光谱法(FCS)进行，任选地与交叉相关和单粒子免疫溶剂激光扫描法、激光扫描显微术(LSM)、Wetfeld显微镜和/或TIRF显微镜，以及相应的超分辨率模式STED、SIM、STORM、dSTORM结合。

18.根据权利要求17的方法，其特征在于，在检测中收集很多数据点使得能够相对背景信号检测单一聚集体。

19.根据权利要求18的方法，其特征在于，只要空间分辨事件存在就读出尽量多的值。

20.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，脑脊液(CSF，脑脊液)、血液和/或尿用作测量试样。

21.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，使用内标或外标用于量化A-β聚集体。

22.根据前述权利要求之一的方法，其特征在于，用于量化A-β聚集体的标准物为由多肽序列构建的聚合物，其中所述多肽序列就其序列而言在相应的部分区域中与内源蛋白质是相同的或与那内源蛋白质在相应的部分区域上具有至少50％的同源性，所述内源蛋白质引起蛋白质聚集疾病或淀粉样变性或蛋白质错误折叠疾病，其中聚合物不聚集。

23.用于根据前述权利要求之一来选择性量化A-β聚集体的试剂盒，含有一种或多种的下列组分：

-用疏水物质涂覆的玻璃基材，

-标准物；

-捕获分子；

-探针；

-含捕获分子的基材；

-溶液；和

-缓冲液。

24.一种测定活性物质和/或用于治疗AD的治疗方法的效力的方法，其特征在于，实施根据权利要求1-22之一的方法，并将活性物质和/或治疗方法根据它们对A-β聚集体形成的作用相互比较，其中选择出与对照相比表现出更低的A-β聚集体形成的那些活性物质和/或治疗方法。