[发明专利]利用人源化的小鼠来确定毒性

权利要求书

1.一种确定药剂是否在人类中引起免疫毒性的方法，包括：

a)向已移植人造血干细胞(HSC)和施用一种或多种人细胞因子的非人类哺乳动物施用该药剂；和

b)确定该药剂是否在该非人类哺乳动物中引起免疫毒性，

其中，如果所述药剂在该非人类哺乳动物中引起免疫毒性，则所述药剂在人类中引起毒性。

2.如权利要求1的方法，其中所述非人类哺乳动物是小鼠。

3.如权利要求2的方法，其中所述小鼠是免疫缺陷小鼠。

4.如权利要求3的方法，其中所述免疫缺陷的小鼠的免疫系统被人T细胞占据。

5.如权利要求2、3或4的方法，其中所述免疫缺陷小鼠是NOD.Cg-Prkdc^scid 1l2rg^tm1Wjl/SzJ(NOD Scidγ)小鼠。

6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述一种或多种人细胞因子包含白介素-15(IL-15)、IL-4、Fms-相关的酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)、粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)、干细胞生长因子、IL-3或它们的组合。

7.如前述权利要求中任一项的方法，其中所述非人类哺乳动物用两种细胞因子处理。

8.如权利要求7的方法，其中所述细胞因子是IL-15和Flt-3L。

9.如前述权利要求中任一项的方法，其中所述药剂是治疗剂。

10.如权利要求9的方法，其中所述治疗剂是抗体、蛋白质、核酸、多糖、脂多糖、脂蛋白、脂质、微生物抗原或纳米颗粒。

11.如权利要求10的方法，其中所述抗体是单克隆抗体。

12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述药剂是否在所述非人类哺乳动物中引起免疫毒性通过测定在施用所述药剂后在所述非人类哺乳动物中发生的免疫细胞的表型、一种或多种肝酶的表达的增加、一种或多种促炎性细胞因子的表达的增加或它们的组合来确定。

13.如权利要求12的方法，其中免疫细胞的表型是通过确定一种或多种免疫细胞的细胞表面标志物、增殖、活化作用或它们的组合而测定的。

14.如权利要求13的方法，其中所述一种或多种免疫细胞包含T细胞、B细胞、自然杀伤(NK)细胞、单核细胞/巨噬细胞、CD45.1⁺细胞或它们的组合。

15.如权利要求14的方法，其中T细胞通过测定表达CD3⁺的细胞确定，B细胞通过测定表达CD19⁺的细胞确定，NK细胞是通过测定表达CD56⁺的细胞确定，和单核细胞/巨噬细胞通过测定表达CD14⁺的细胞确定。

16.如权利要求12的方法，其中所述一种或多种促炎性人细胞因子包含白介素-2(IL-2)、IL-6、IL-8、IL-1β、IL-4、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)或它们的组合。

17.如权利要求16的方法，其中所述一种或多种促炎性细胞因子使用荧光激活细胞分选法测定。

18.如权利要求12的方法，其中所述一种或多种肝酶包括天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶或它们的组合。

19.如前述权利要求中任一项的方法，其中该药剂是否在所述非人类哺乳动物中引起毒性是在施用药剂后的一小时或多小时、数天、数周、数月或数年内确定。

20.如前述权利要求中任一项的方法，还包括比较所述药剂是否在对照中引起毒性。

21.一种确定对人类施用药剂是否在人类中引起细胞因子释放综合征的方法，包括：

a)向已移植人造血干细胞(HSC)和施用一种或多种人细胞因子的非人类哺乳动物施用该药剂；和

b)确定所述药剂是否在所述非人类哺乳动物中引起细胞因子释放综合征，

其中，如果所述药剂在所述非人类哺乳动物中引起细胞因子释放综合征，则该药剂在人类中引起细胞因子释放综合征。