[发明专利]新型MVA病毒及其用途

权利要求书

1.一种改造的安卡拉牛痘（MVA）病毒，所述病毒包含：

编码A3L基因产物、A34R基因产物和A9L基因产物的核酸序列，其中，

（i）所述A3L基因产物具有H639Y突变，其中，位于所述A3L基因产物第639位的氨基酸位置的H被Y替代，所述A3L基因产物的氨基酸序列为SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列；

（ii）所述A34R基因产物具有D68Y突变，其中，位于所述A34R基因产物第86位的氨基酸位置的D被Y替代，所述A34R基因产物的氨基酸序列为SEQ ID NO：5所示的氨基酸序列；以及

（iii）所述A9L基因产物具有K75E突变，其中，位于所述A9L基因产物第75位的氨基酸位置的K被E替代，所述A9L基因产物的氨基酸序列为SEQ ID NO：6所示的氨基酸序列。

2.权利要求1所述的MVA病毒，其中，所述病毒还包含异源核酸序列。

3.权利要求2所述的MVA病毒，其中，所述异源核酸序列选自于编码抗原，诊断性化合物或治疗性化合物的序列。

4.权利要求2所述的MVA病毒，其中，所述异源核酸序列为编码抗原表位的序列。

5.权利要求1-4中任一项所述的MVA病毒，其中，所述病毒在禽类细胞中能够生产性复制。

6.权利要求1-4中任一项所述的MVA病毒，其中，所述病毒在灵长类动物细胞中不能生产性复制。

7.权利要求5所述的MVA病毒，其中，所述病毒在灵长类动物细胞中不能生产性复制。

8.权利要求6所述的MVA病毒，其中，所述病毒在人类细胞中不能生产性复制。

9.权利要求7所述的MVA病毒，其中，所述病毒在人类细胞中不能生产性复制。

10.权利要求1-9中任一项所述的MVA病毒的基因组。

11.包含权利要求1-9中任一项所述的MVA病毒或权利要求10所述的基因组的细胞。

12.权利要求11所述的细胞，其中，所述细胞为非贴壁/悬浮细胞。

13.权利要求11或12所述的细胞，其中，所述细胞为禽类细胞。

14.权利要求1-9中任一项所述的MVA病毒的培养方法，所述方法包含如下步骤：

（i）提供权利要求11-13中任一项所述的细胞；

（ii）对所述细胞进行培养；以及

（iii）分离所述MVA病毒。

15.权利要求14所述的方法，其中，在细胞增殖介质并随后在病毒生产介质中对所述细胞进行培养，或仅在细胞增殖介质中对所述细胞进行培养。

16.权利要求14或15所述的方法，其中，从无细胞上清液和/或细胞裂解液中分离所述MVA病毒。

17.权利要求1-9中任一项所述的MVA病毒的生产方法，所述方法包含如下步骤：

（i）用MVA病毒感染细胞；

（ii）对所述细胞进行培养；

（iii）分离所述MVA病毒；以及

（iv）利用步骤（iii）中分离的所述MVA病毒重复步骤（i）至步骤（iii），直至检测到包含编码A3L基因产物、A34R基因产物和A9L基因产物的核酸序列的MVA病毒。

18.权利要求17所述的方法，其中，在病毒生产介质中对所述细胞进行培养。