[发明专利]新型MVA病毒及其用途

说明书

本发明涉及新型的改造安卡拉牛痘(MVA)病毒。本发明还涉及所述MVA病毒的培养方法以及所述MVA病毒的生产方法。进而，本发明涉及包含所述MVA病毒以及一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂和/或载体的药物组合物。此外，本发明涉及包含所述MVA病毒的疫苗。另外，本发明涉及所述MVA病毒在医药方面的用途。

技术领域

本发明涉及新型的改造安卡拉牛痘(Modified Vaccinia Ankara，MVA)病毒。本发明还涉及所述MVA病毒的培养方法以及所述MVA病毒的生产方法。进而，本发明涉及包含所述MVA病毒及一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂和/或载体的药物组合物。此外，本发明涉及包含所述MVA病毒的疫苗。另外，本发明涉及所述MVA病毒在医药方面的用途。

背景技术

疫苗是可利用的最为有效的人类健康干预措施之一，针对非常广谱的感染性疾病发挥防护作用。然而，仍不能针对多种潜伏病原体和慢性病原体产生保护性免疫或治疗性免疫。主要引发抗体应答的传统方法还未成功。原因包括表位可能是易变的，经常被微生物诱饵遮蔽或保护，或者由于病原体以抗体无法接近的方式隐藏。

与使用灭活病毒体或纯化亚单位的免疫接种相比，活疫苗诱导还牵涉免疫系统的细胞区室(cellular compartment)的广泛应答。然而，由于免疫功能低下的个体数量的增加以及国际流动性的扩大，使用具有复制能力的毒株可能涉及诸如回复突变(reversion)为更多种病原体形式的风险(Zurbriggen等，2008，Appl Environ Microbiol 74，5608-5614)或者对疫苗的接受者和接触人员均造成严重的不良状况(Kemper等，2002，Eff ClinPract 5，84-90；Parrino和Graham，2006，J Allergy Clin Immunol118，1320-1326)。

现代的载体化疫苗(Excler等，2010，Biologicals 38，511-521；Plotkin，2009，Clin Vaccine Immunol 16，1709-1719)将不能在人或动物接受者中复制的宿主受限载体(host-restricted vector)所固有的高度安全属性与减毒感染的优势结合起来。特别有前景的超减毒载体为宿主受限痘病毒，包括改造的安卡拉牛痘(MVA)病毒。超减毒痘病毒已在临床实验中显示出安全性(Cebere等，2006，Vaccine 24，417-425；Dorrell等，2007，Vaccine 25，3277-3283；Gilbert等，2006，Vaccine 24，4554-4561；Mayr，2003，CompImmunol Microbiol Infect Dis 26，423-430；Webster等，2005，Proc Natl Acad Sci U SA 102，4836-4841)，并且，所述超减毒痘病毒还是免疫应答的有效刺激物(Drillien等，2004，J Gen Virol 85，2167-2175；Liu等，2008，BMC Immunol 9，15；Ryan等，2007，Vaccine25，3380-3390；Sutter和Moss，1992，Proc Natl Acad Sci U S A 89，10847-10851；Sutter等，1994，Vaccine 12，1032-1040)。特别地，MVA病毒与痘病毒科(Poxviridae)正痘病毒属(Orthopoxvirus)的成员牛痘(Vaccinia)病毒相关。已通过将尿囊绒毛膜安卡拉牛痘(Chorioallantois Vaccinia Ankara，CVA)病毒在鸡胚成纤维细胞上连续传代516次产生MVA病毒。在作为生产基质的鸡源材料上反复传代的减毒过程中，MVA病毒在多个位点丧失了约15％的基因组DNA(Mayr和Munz，1964，Zentralbl Bakteriol Orig195，24-35；Meyer等，1991，J Gen Virol 72(Pt 5)，1031-1038)。分析确定了MVA病毒相对于野生型CVA毒株的基因组改变。识别出基因组DNA的六个主要缺失(缺失I、II、III、IV、V和VI)，共计31,000个碱基对(Meyer等，1991，J Gen Virol 72(Pt 5)，1031-1038)。其宿主细胞变得严格限于禽类细胞。虽然亲代牛痘病毒具有广泛的宿主范围，MVA病毒具有非常窄的宿主范围。例如，MVA在人类和非人灵长类细胞中不复制。在人HeLa细胞系中，复制阻断似乎发生在基因组组装中的限定步骤(Sancho等，2002，J Virol 76，8318-8334)。此外，HEK 293和Vero细胞系不是优选的生产体系。进一步显示了在多种动物模型中，获得的MVA病毒明显无毒(Mayr和Danner，1978，Dev Biol Stand 41，225-234)。此外，临床实验中测试了将MVA毒株作为疫苗针对人类天花病进行免疫(Mayr，2003，Comp Immunol Microbiol Infect Dis 26，423-430)。这些研究涉及超过120,000个人，其中包括高风险患者，证明了与CVA相比，MVA在保持良好的免疫原性的同时，具有减弱的毒力或感染力。