[发明专利]酵母β-D-葡聚糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种酵母β-D-葡聚糖的制备方法。

背景技术

β-D-葡聚糖是一类广泛存在于细菌、真菌、藻类和植物体内的多糖，它的主要来源之一即为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisisae）。酵母β-D-葡聚糖占酵母细胞壁的50%左右，其分子内多羟基相互作用形成致密的三股螺旋结构，直径一般在20~80μm。酵母β-D-葡聚糖具有增强免疫力、抗消炎、抗菌、抗感染、抗病毒、抗癌、降低胆固醇、防辐射、治愈伤口等诸多生理功能，是一种良好的生物效应调节剂[BRMs]。我国有着丰富的酿酒酵母资源，如废啤酒酵母。近年来，我国啤酒工业发展迅猛，年产量已经超过4000万吨，而啤酒废酵母作为啤酒工业主要的副产物之一，年产量也已达40~70万吨，但是目前酿酒酵母的开发利用率极低，不仅浪费资源，还容易污染环境，所以亟需利用现代的科学技术加强对酿酒酵母资源的综合利用，这将具有极大的经济效益和社会效益。

现有酿酒酵母β-D-葡聚糖的制备方法主要有酸法、碱法、酸碱法、酶法、超声波法和结合法等方法。虽然制备酿酒酵母β-D-葡聚糖的方法众多，但是大多产业化规模生产受限。目前，我国广泛用于工业化生产酿酒酵母β-葡聚糖的方法主要为碱法，虽然碱法制备出的产品纯度高，但是碱法会破坏β-D-葡聚糖的结构而使得率低，且大量使用碱会污染环境和损害人体健康。采用非强酸、强碱等温和条件制备适合产业化生产高纯度酵母β-D-葡聚糖且的方法尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种酵母β-D-葡聚糖的制备方法，该方法采用自溶、高温抽提、高压微射流均质和酶解结合由酿酒酵母制备β-D-葡聚糖，制备条件温和，不采用强酸、强碱和有机溶剂等对环境有害的试剂，且可实现产业化规模生产。

本发明所提供的一种酵母β-D-葡聚糖的制备方法，包括如下步骤：

（1）将酿酒酵母加入至水中得到悬浮液，记为悬浮液a；向所述悬浮液a中加入NaCl，然后进行诱导自溶，再经灭酶活后进行离心，得到沉淀，记为沉淀a；

（2）向所述沉淀a中加入磷酸盐缓冲液a得到悬浮液，记为悬浮液b，经抽提后进行离心处理，得到沉淀，记为沉淀b；

（3）向所述沉淀b中加入水得到悬浮液，记为悬浮液c；将所述悬浮液c进行微射流均质处理，然后经离心得到沉淀，记为沉淀c；

（4）向所述沉淀c中加入磷酸盐缓冲液b得到悬浮液，记为悬浮液d；向所述悬浮液d中加入酶进行酶解，然后进行灭酶活处理；

（5）对经步骤（4）处理后的酶解液进行微射流均质处理，然后经离心得到沉淀，记为沉淀d；

（6）所述沉淀d依次经脱水和干燥后即得到所述酵母β-D-葡聚糖。

上述的制备方法中，步骤（1）中，所述悬浮液a中所述酿酒酵母与所述水的体积份数比可为1：2~20，具体可为1：5~20、1：5或1：20；

所述悬浮液a中所述NaCl的质量百分含量可为2%~5%，具体可为3%；

所述诱导自溶的温度可为45℃~60℃，时间可为10~30小时，pH值可为4.5~5.5，具体可在pH值为5.0、温度为55℃下诱导自溶24小时；

所述灭酶活的温度可为85℃~100℃，具体可为85℃或100℃，时间可为10~20min，具体可为10~15min、10min或15min；

所述方法还包括用水洗涤所述沉淀a的步骤。

上述的制备方法中，步骤（2）中，所述悬浮液b中所述沉淀a与所述磷酸盐缓冲液a的质量份数比可为1：3~20，具体可为1：5~20、1：5或1：20；

所述抽提的温度可为80℃~120℃，时间可为2~7小时，如在95℃的条件下抽提4小时；

所述方法还包括用水洗涤所述沉淀b的步骤；

所述磷酸盐缓冲液a的浓度可为0.02mol/L，pH值可为7.5。

上述的制备方法中，步骤（3）中，所述悬浮液c中所述沉淀b与所述水的质量份数比可为1：3~20，具体可为1：4~20、1：4或1：20；

所述微射流均质处理的压力可为70~250MPa，具体可为200MPa，处理流量可为25~200mL/min，具体可为200mL/min；

所述微射流均质处理的处理次数可为1~8次；

所述方法还包括用水洗涤所述沉淀c的步骤。

上述的制备方法中，步骤（4）中，所述悬浮液d中所述沉淀c与所述磷酸盐缓冲液b的质量份数比可为1：3~20，具体可为1：3或1：20；