[发明专利]一种水产用微生态净水剂及其制备和应用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于水产养殖用的微生态水质调节剂及其制备和应用方法，属于微生物制剂技术领域和生物环保领域。 

背景技术

随着我国水产养殖业的迅速发展，一些制约水产养殖业健康、持续发展的问题也日益突显。其一，大量工业废水、生活污水的排放对养殖水体造成了灾难性的影响；其二，养殖生产缺乏全面规划和有效管理，盲目无序的造池，大规模增加网箱，片面追求高产出的养殖方式，更是加剧了水质的恶化；其三，不合理投饵所产生的残饵、粪便及渔药的滥用，使水体微生态平衡遭到严重破坏，给水产养殖业造成了直接或间接的负面影响。鉴于以上原因，近年来水产养殖病害频繁发生、水产品失去固有的鲜味以及水体富营养化等，对水产养殖业造成了严重的经济损失。因此采取生物手段和高科技手段治理水体污染，促进养殖业健康发展，保证水体生态环境的良性循环，已是刻不容缓的任务。 

发明内容

本发明针对水产养殖现状，充分利用微生物的生理功能和可修饰性特点进行污染养殖水体的生物修复模拟研究，通过分离、筛选、驯化高效降解菌株，并利用各菌株的功能互补性构建一种复合微生物制剂，并提供其制备和应用方法。降低水体中的化学需氧量和氨氮、亚硝酸盐的浓度，改善养殖水域环境，提高养殖对象的机体免疫力，减少病害的发生，使养殖业良性循环发展。 

一种水产用微生态净水剂的制备方法，由蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）CGMCC No.4918、侧孢芽孢杆菌（bacillus laterosporus）CGMCC No.6885和酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CGMCC No.6884，这3种菌的发酵菌液按1:1:1的体积比配制而成。 

所述的蜡状芽孢杆菌的发酵菌液的制备依次如下： 

新鲜斜面菌种制备，其条件为：LB培养基，30℃，24h； 

摇床种子培养，其条件为：pH7.2~7.5、温度30℃~32℃，转速200r/min~220r/min，培 养10~12h；培养基的组成为蛋白胨10g，NaCl5g，牛肉膏3g，蒸馏水定容至1L； 

液体发酵，其条件为：20L发酵罐培养基装量为12L，搅拌速度200r/min~220r/min，初始pH7.0~7.2，通气比为1.1:1~1.2:1，摇床种子培养液接种量为培养基体积的3%~4%，30℃~32℃温度下发酵24h~28h；培养基组成为：玉米淀粉1.8%~2.0%，工业蛋白胨1.0%~1.2%，MnSO₄0.02%，CaCl₂0.02%~0.03%，K₂HPO₄0.012%，KH₂PO₄0.025%，其余为水；每次发酵芽孢数在1.8×10¹⁰cfu/mL~2.5×10¹⁰cfu/mL之间。 

所述的侧孢芽孢杆菌的发酵菌液的制备依次如下： 

新鲜斜面菌种制备，其条件为：LB培养基，35℃，28h； 

摇床种子培养，其条件为：pH7.0~7.2、温度32℃~35℃，转速180r/min~200r/min，培养14h~16h；培养基的组成为：蛋白胨10g，NaCl5g，牛肉膏3g，蒸馏水定容至1L； 

液体发酵，其条件为：20L发酵罐培养基装量为12L，搅拌速度180r/min~200r/min，初始pH7.0~7.2，通气比1:1~1.1:1，摇床种子培养液接种量为培养基体积的3%~4%，32℃~35℃温度下发酵28h~36h；培养基组成为：葡萄糖2.0%~2.2%，酵母膏0.9%~1.1%，MnSO₄0.02%，CaCl₂0.02%~0.03%，KH₂PO₄0.01%，MgSO₄0.005%，其余为水；每次发酵芽孢数在8×10⁹cfu/mL~1.02×10¹⁰cfu/mL之间。 

所述的酿酒酵母的发酵菌液的制备依次如下： 

新鲜斜面菌种制备，其条件为：PDA培养基，28℃，36h~48h； 

摇床种子培养，其条件为：pH自然、温度26℃~28℃，转速180r/min~200r/min，培养24h~28h；培养基的组成为葡萄糖20g，酵母膏10g，蛋白胨10g，蒸馏水定容至1L；