[发明专利]高粘附性丁酸梭菌及其制备方法有效

专利信息
申请号: 201310007380.7 申请日: 2013-01-09
公开(公告)号: CN103911337A 公开(公告)日: 2014-07-09
发明(设计)人: 孔青;迟晨;管斌;林洪 申请(专利权)人: 中国海洋大学
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/31;C12N15/74;C07K14/335;A61K35/74;A61P1/12;C02F3/34;C12R1/145
代理公司: 山东清泰律师事务所 37222 代理人: 聂磊
地址: 266100 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 粘附 丁酸 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.高粘附性丁酸梭菌,其特征在于,该重组菌株是携带重组质粒的丁酸梭菌,所述的重组质粒是含乳杆菌粘附蛋白基因的枯草芽孢杆菌质粒pHY300PLK。

2.根据权利要求1所述的乳杆菌粘附蛋白基因,其特征是:该基因的核苷酸序列为SEQ ID No:2。

3.根据权利要求1或2所述的乳杆菌粘附蛋白基因编码的粘附蛋白,其特征是:所述的蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No:1。

4.一种利用基因工程技术制备高粘附性丁酸梭菌的方法,特征在于利用携带乳杆菌粘附蛋白基因编码区的重组表达载体,采用转基因方法在丁酸梭菌中表达乳杆菌粘附蛋白,从而提高丁酸梭菌的粘附能力,其步骤如下:

(1)采用基因克隆的方法获得乳杆菌粘附蛋白基因编码区;

(2)把乳杆菌粘附蛋白基因编码区连于表达调控序列,形成重组表达载体;

(3)将重组表达载体转化至丁酸梭菌中;

(4)筛选和鉴定丁酸梭菌转化子;

(5)培养丁酸梭菌阳性克隆,获得基因重组后的丁酸梭菌。

5.根据权利要求1所述的高粘附性丁酸梭菌,其特征在于它导入了乳杆菌的粘附蛋白基因序列,可表达粘附蛋白,从而提高了粘附能力,可大大提高其在动物肠道中的定植能力。

6.根据权利要求1所述的高粘附性丁酸梭菌,对于抗生素引起的鸡、猪腹泻,有较强的治疗作用,最佳使用量为106个/千克体重。

7.根据权利要求1所述的高粘附性丁酸梭菌,与壳聚糖、低聚寡糖(如低聚木糖、甘露寡糖等)等混合使用,效果更佳,最佳重量比例为1:1~100:1~100。

8.根据权利要求1所述的高粘附性丁酸梭菌,用于水产养殖或改善水质,所用浓度为104个/毫升。

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