[发明专利]含氮杂环衍生物，其制备方法及其在制备组蛋白去乙酰化酶Ⅰ抑制剂中的应用

说明书

技术领域：

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种含氮杂环衍生物及其制备方法和在制备组蛋白去乙酰化酶Ⅰ抑制剂中的应用，以及含有该含氮杂环衍生物的药物组合物。

背景技术：

真核基因的表达异常在许多疾病的发病机制中有着重要的作用，其表达受遗传调控和表观遗传调控双重调控。遗传调控包括基因转录、转录后加工、翻译以及翻译后修饰等环节；表观遗传调控是指转录前基因在染色质水平上的结构调整，它是真核生物一种独特的调控机制。表观遗传调控主要包括DNA甲基化、RNA干涉、组蛋白修饰三方面，可以在不改变DNA编码序列的前提下使基因发生可遗传的沉默。由组蛋白修饰所引起的染色体局部构象的改变，在真核生物基因表达调控中发挥着重要的作用。组蛋白的翻译后修饰，包括对组蛋白尾部的赖氨酸和精氨酸残基的乙酰化、甲基化、磷酸化、以及泛素化等，这些修饰构成了组蛋白密码。组蛋白密码作为一种DNA序列之外的基因信息的储存和补充机制，大大扩展了基因编码的信息量。其中，组蛋白的乙酰化修饰较为普遍，也是近年来研究最为深入的组蛋白密码。

含4种组蛋白的组蛋白核心围绕DNA双链组成染色质的基本重复单位核小体，这个组蛋白核心包含一个H3-H4四聚体和两个H2A-H2B二聚体，组蛋白H1附着在核小体间的连接部分，并通过它富含正电核的氨基末端和DNA链上的负电荷作用以保持染色质结构的稳定性。组蛋白在H3和H4上的乙酰化修饰较H2A和H2B更为普遍，比较重要的乙酰化位点是H3上的Lys9和Lys14、以及H4上的Lys5、Lys8、Lys12、Lys16。一般认为，基因的转录活性和染色体的局部构象密切相关。组蛋白的乙酰化/去乙酰化可以改变染色体的局部构象，影响DNA与转录调控的非核小体复合物之间的相互作用，进而调控特定基因的表达。组蛋白的乙酰化水平是由组蛋白乙酰化酶（Histone acetylases,HATs）和组蛋白去乙酰化酶（Histone deacetylases,HDACs)共同调控的。HATs能催化乙酰辅酶A上的乙酰基转移到组蛋白的N-端赖氨酸残基，中和正电荷，使DNA与组蛋白之间的相互作用减弱，染色体呈具转录活性的松散结构，有利于转录因子与DNA结合，转录激活。反之，HDACs的去乙酰化作用造成转录抑制。

近年的研究表明，抑制HDACs有望用于治疗多种疾病，如：白血病，肿瘤，炎症和神经退行性疾病。而其对肿瘤的有效作用最为引人关注。HDACs抑制剂可以抑制白血病或实体肿瘤细胞增殖，并诱导肿瘤细胞分化。HDAC抑制剂一般可使肿瘤细胞停滞于G1期，但有时也会观察到G2期细胞增多。几乎所有HDACs抑制剂都会激活周期蛋白依赖激酶抑制因子P21CIPI/WAF1（由CHKN1A基因编码）的转录，P21CIPI/WAF1可以与cyclin E-CDK2及cyclin A-CDK2复合物结合，使其失活；另外，很多HDACs抑制剂还能下调细胞内cyclin A和cyclin D的水平，阻止肿瘤抑制蛋白视网膜母细胞瘤蛋白Rb磷酸化，细胞不能进入S期，细胞周期无法进行。CDKN1A对于HDACs抑制剂介导的G1期抑制起关键作用，如果细胞缺失CDKN1A基因，刚细胞进入S期，DNA复制，可以检测到细胞内的DNA为4n，细胞易于发生凋亡。HDAC抑制剂对于P21CIPI/WAF1的激活作用是不依赖于p53的，这点尤为重要，因为肿瘤细胞普遍存在于P53功能异常而导致的增殖失控。

HDACs抑制剂还能使人正常纤维原细胞及某些肿瘤细胞产生一个G2期调控点，因此，正常细胞可以以一种安全的方式退出细胞周期，这也可能是HDAC抑制剂对正常细胞或组织几乎无毒副作用的原因之一。

另外，很多研究都观察到HDACs诱导的调亡是与蛋白质的合成相关的。如果抑制蛋白质的合成，会拮抗HDACs诱导的调亡。