[发明专利]从多黏菌素B的混合组分中分离纯化多黏菌素B1的方法有效
申请号: | 201310012123.2 | 申请日: | 2013-01-14 |
公开(公告)号: | CN103923190B | 公开(公告)日: | 2018-04-03 |
发明(设计)人: | 侯静品;赵文杰;赵波;那可;魏晓东;杨筱静;徐加兵;许炜;刘永双;马川川 | 申请(专利权)人: | 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 |
主分类号: | C07K7/62 | 分类号: | C07K7/62;C07K1/22 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所11256 | 代理人: | 陈长会,谢燕军 |
地址: | 200040 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 菌素 混合 组分 分离 纯化 b1 方法 | ||
1.从多黏菌素B的混合组分中分离纯化多黏菌素B1的方法,包括如下步骤:
(a)将大孔型吸附树脂的层析介质装成层析柱,其中大孔型吸附树脂的层析介质为以聚苯乙烯/二乙烯苯或聚丙烯酸酯为骨架的小颗粒反相层析介质,且所述小颗粒反相层析介质的粒径为20-120μm,其中所述大孔型吸附树脂选自PS30-300或PS25-300;
(b)将多黏菌素B溶液上样,用含有机溶剂的酸性水溶液作为洗脱液,把多黏菌素B的各组分依次洗脱下来,获得多黏菌素B1的洗脱液,其中所述有机溶剂选自乙腈、乙醇或异丙醇,且有机溶剂的浓度为5-15%(V/V);和其中所述酸性水溶液选自H2SO4、醋酸或甲酸,且所述酸性水溶液的pH为2.0-3.0。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤(a)还包括在上样前先用洗脱液将层析柱平衡。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于在步骤(b)的洗脱过程中,采用色谱分析法对各组分浓度进行测定。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于所述色谱分析法为欧洲药典7.0所规定的液相分析法。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤(b)中获得的多黏菌素B1洗脱液用色谱分析法进行测定,收集多黏菌素B1峰纯度大于98%的部分。
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