[发明专利]一种芪参益气滴丸有效成分的检测方法

说明书

技术领域：

本发明属于中药检测领域，具体涉及一种芪参益气滴丸的鉴别方法与含量测定方法。

背景技术：

芪参益气滴丸（QSYQ）是由黄芪、丹参、三七和降香油组成的中药复方制剂。于2003年经中国国家食品药品监督管理局批准用于治疗冠心病、心绞痛，具有剂量小、服用方便、溶出速度快、可直接经粘膜吸收入血、生物利用度高、疗效高及无胃肠刺激、无明显毒副作用的特点。

临床前药效学试验表明，芪参益气滴丸可以使心肌梗塞犬的梗塞范围缩小，缺血性心电图改善，血清酶CK和LDH活性降低，血浆ET和TXB2水平降低，6-Keto-PGF1α活性和6-Keto-PGF1α/TXB2比值升高；可使心肌缺血再灌注损伤大鼠的梗塞范围缩小，SOD活性增加。芪参益气滴丸可使大鼠体外血栓长度缩短，重量减轻，并可使血浆及全血粘度降低；可使高脂血症家兔的TC、TG、LDL-C、VLDL-C水平降低，HDL-C水平升高，使主动脉TC含量和肝脏TG及MDA含量降低；并可使花生四烯酸和胶原诱导的血小板聚集率降低；犬血流动力学试验表明，芪参益气滴丸可通过扩张冠脉血管使冠脉流量增加，使心肌耗氧指数降低；在不增加左室做功情况下，使心搏出量和心输出量增加等。

在生产过程中，需要对芪参益气滴丸的制备过程的中间体和成品进行检测，以随时控制产品的质量，现有检测方法，有些准确性差，灵敏度不高，有些使用价格昂贵的试剂和仪器，有些操作步骤繁琐，为了更好地控制芪参益气滴丸的质量，本发明研究出一种芪参益气滴丸有效成分的检测方法。

发明内容：

本发明公开了一种芪参益气滴丸有效成分的检测方法，包括三七，黄芪和降香的鉴别方法及丹参素的含量测定方法。

根据本发明，三七和黄芪的鉴别方法，包括如下步骤：

①三七和黄芪供试品溶液的制备：取芪参益气滴丸，加氨试液超声使溶解，过大孔树脂柱，依次使用水、乙醚、三氯甲烷、甲醇洗脱，收集洗脱液即为三七和黄芪供试品溶液；

②三七和黄芪对照品溶液的制备：取三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rg1对照品、黄芪甲苷对照品，加甲醇制成混合溶液，即为三七和黄芪对照品溶液；

③三七和黄芪的薄层鉴别：取所述三七和黄芪供试品溶液以及所述三七和黄芪对照品溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，展开，取出，晾干，显色，比较所述三七和黄芪供试品溶液以及所述三七和黄芪对照品溶液的斑点。

根据本发明，降香的鉴别方法，包括如下步骤：

①降香供试品溶液的制备：取芪参益气滴丸，加氨试液使溶解，大孔树脂处理，收集洗脱液即为降香供试品溶液；

②降香对照药材溶液的制备：取降香对照药材，加乙醚，水浴回流，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇使溶解，即为降香对照药材溶液；

③降香薄层鉴别：取所述降香供试品溶液以及所述降香对照药材溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，展开，取出，晾干，显色，比较所述降香供试品溶液以及所述降香对照药材溶液的斑点。

根据本发明，丹参素的含量测定方法，包括如下步骤：

①供试品溶液的制备：取芪参益气滴丸，置量瓶中，加水，超声处理，加水定容，摇匀，离心或过滤，即得供试品溶液；

②对照品溶液的制备：取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇溶液制成溶液，即得对照品溶液。

③丹参素的含量测定：采用超高效液相色谱法测定丹参素的含量。

根据本发明实施方式之一，所述三七和黄芪供试品溶液的制备为：取芪参益气滴丸0.5-5g，加氨试液3-25ml超声使溶解，通过大孔树脂柱；用水18-30ml洗脱，弃去洗脱液，再用乙醚8-20ml洗脱，洗脱液备用；继续用三氯甲烷3-15ml洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇3-7ml缓慢洗脱，弃去最初洗脱液1-2ml，收集后2-6ml甲醇洗脱液即为三七和黄芪供试品溶液。

根据本发明另一实施方式，所述三七和黄芪的鉴别方法的步骤③为：取所述三七和黄芪供试品溶液以及所述三七和黄芪对照品溶液，分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（60：30：10）10℃以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5-16%硫酸乙醇溶液，在100-140℃加热至斑点显色清晰。

考察了三七阴性样品溶液和黄芪阴性样品溶液对实验的影响，结果表明，在该实验条件下，阴性样品溶液均无干扰。

考察了不同薄层板及低温高湿环境对分离情况的影响，结果表明上述不同条件对鉴别试验无影响。