[发明专利]一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法

权利要求书

1.一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法，其特征在于，包括下列步骤：

1）制备均质的间充质干细胞的培养基；

2）多种小RNA分子的组合；

3）核酸多肽纳米粒的组装和转染；

4）转决定后的造血干细胞诱导扩增培养基；

5）激活多种造血相关的基因。

2.如权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法，其特征在于：所述培养基是指在无血清的高糖DMEM/F12培养基中添的EGF，FGF-2,PDGF-BB，IGF和TGF-β五因子。

3.如权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法，其特征在于：所述培养基是指在无血清的高糖DMEM/F12培养基中添的shh，SCF，TPO，Flt3L，Delta1，IGFBP，Angiopoietin，MBP4，LIF，TGF-β十因子。

4.如权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法，其特征在于：所述多种小RNA分子是指miR-138-1，miR-138-2，miR-433以及靶向EID1mRNA不同位点的siR-EID1分子的序列。

5.如权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法，其特征在于：所述转决定后的造血干细胞培养是指在造血干细胞诱导扩增培养基中以5×10⁵/ml的细胞密度进行培养至少3天。

6.如权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法，其特征在于：所述激活多种造血相关的基因是指Runx1,Bmi1,HoxB4,Gata1,Gata2,Gfi1,Sall4,Pu.1,Scl，Mcl，C-myc，C-myb,Kcl4,Cxcr4,和Crb。

7.如权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法，其特征在于：所述的间充干细胞培养基配方可制造成不同的培养试剂盒，其中包括不同间充质干细胞增殖所需要的细胞增殖因子、细胞分化抑制剂。

8.如权利要求1所述的一种能够大规模并快速高纯度地诱导间充质干细胞转决定成造血干细胞的方法，其特征在于：所述造血干细胞扩增用培养基配方包括0-1μg/ml Sonic hedgehog、0-1μg/ml Delta1、0-1μg/ml FGF2、0-1μg/ml IGFBP、0-1μg/ml SCF、0-1μg/ml Angiopoietin、0-1μg/mlTPO、0-1μg/ml MBP、0-1μg/ml LIF、0-1μg/ml TGF-β、0-100μM MTEPA、1-5mM NAC。