[发明专利]一种铁皮石斛无糖组织培养方法有效
申请号: | 201310029289.5 | 申请日: | 2013-01-27 |
公开(公告)号: | CN103039368A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
发明(设计)人: | 蒋娉;张国武;张国忠;张华明;张银生 | 申请(专利权)人: | 云南天泉生物科技股份有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人: | 赛晓刚 |
地址: | 650500 云南省昆明*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 铁皮 石斛 组织培养 方法 | ||
1.一种铁皮石斛无糖组织培养方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)外植体准备:选择典型性状健康的铁皮石斛种苗的茎,以茎芽为中心上下各留0.5cm剪下茎段作为体皮石斛无糖组织培养的外植体,将外植体浸泡在酒精体积百分含量70%的烧杯中2分钟进行灭菌,然后用无菌水冲洗l 次;
(2)初代无糖组织培养:将经步骤(1)处理的外植体接种至铁皮石斛无糖组织培养初代培养基中,置于不锈钢外壳植物生长箱进行初代培养;
(3)无根苗筛选:将经过步骤(2)培养的无根苗进行筛选,选择大小达3 - 4cm 的无根苗并用无菌水冲洗,将冲洗干净的无根苗切割为单苗;
(4)继代无糖组织培养:将经步骤(3)处理的单苗接种至铁皮石斛无糖组织培养继代培养基中,置于不锈钢外壳植物生长箱进行继代培养。
2.根据权利1所述的铁皮石斛无糖组织培养方法,其特征在于:在步骤(2)所述铁皮石斛无糖组织培养初代培养基中,a-萘乙酸的含量为0.1—0.5mg/L, 6-苄氨基腺嘌呤的含量为1—3mg/L,香蕉汁的含量为80—120g/L,活性炭的含量为200—300mg / L ,0.25毫米的沙粒的含量为8—10g/L,PH为5.6。
3.根据权利1所述的铁皮石斛无糖组织培养方法,其特征在于:在步骤(2)所述的初代无糖组织培养中,培养周期20—40天,CO2浓度650±50μL/L,培养温度20℃—26℃,光照强度1800—2100Lx,光照时间16—20小时/天。
4.根据权利1所述的铁皮石斛无糖组织培养方法,其特征在于:在步骤(4)所述铁皮石斛无糖组织培养继代培养基中,6-苄氨基腺嘌呤的含量为1—3mg/L,香蕉汁的含量为80—120g/L,活性炭的含量为300—600mg / L, 0.25毫米的沙粒的含量为8—10g/L, PH为5.6。
5.根据权利1所述的铁皮石斛无糖组织培养方法,其特征在于:在步骤(4)所述的继代无糖组织培养中,培养周期30—60天,CO2浓度650±50μL/L,培养温度20℃—26℃,光照强度1800—2100Lx,光照时间16—20小时/天。
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