[发明专利]包含一种或多种可组合的突变的芽孢杆菌属枯草杆菌蛋白酶

权利要求书

1.芽孢杆菌属枯草杆菌蛋白酶的分离的枯草杆菌蛋白酶变体，其中所述枯草杆菌蛋白酶变体是具有蛋白水解活性的成熟形式，并包含在选自24、45、101、109、118、213和217的两个或多个位置处的替换，其中所述位置通过对应于如SEQ ID NO：1所述的解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)枯草杆菌蛋白酶BPN’的氨基酸序列而进行编号。

2.权利要求1所述的分离的枯草杆菌蛋白酶变体，其中所述枯草杆菌蛋白酶变体具有大于或等于0.5的相对蛋白质表达水平性能指数(TCA PI)和/或去污活性性能指数(BMI PI)。

3.权利要求1或2所述的分离的枯草杆菌蛋白酶变体，其中所述芽孢杆菌属枯草杆菌蛋白酶是FNA，并且其中所述替换在选自S24Q、S24E、S24L、S24R、A45Q、A45E、A45L、A45R、S101Q、S101E、S101L、S101R、N109Q、N109E、N109L、N109R、K213Q、K213E、K213L、K213R、L217Q、L217E的两个或多个位置处，其中所述位置对应于SEQ ID NO：1的BPN’枯草杆菌蛋白酶的位置。

4.权利要求1、2或3中任一项所述的分离的枯草杆菌蛋白酶变体，其中所述芽孢杆菌属枯草杆菌蛋白酶是FNA，且其中所述替换在选自A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24Q-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，N109Q-N118Q-K213Q，N118Q-K213Q，S24E-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24E-A45E-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24E-A45E-S101E-N109Q-N118Q-K213Q，S24E-A45E-S101E-N109E-N118Q-K213Q，S24E-A45E-S101E-N109E-N118E-K213Q，S24E-A45E-S101E-N109E-N118E-K213E，S24L-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24L-A45L-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24L-A45L-S101L-N109Q-N118Q-K213Q，S24L-A45L-S101L-N109L-N118Q-K213Q，S24L-A45L-S101L-N109L-N118L-K213Q，S24L-A45L-S101L-N109L-N118L-K213L，S24R-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24R-A45R-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q，S24RA45R-S101R-N109Q-N118Q-K213Q，S24R-A45R-S101R-N109R-N118Q-K213Q，S24R-A45R-S101R-N109R-N118R-K213Q，S24R-A45R-S101R-N109R-N118R-K213R，S24E-A45R-S101R-N109R-N118R-K213R，S24E-A45E-S101R-N109R-N118R-K213R，S24E-A45E-S101E-N109R-N118R-K213R，S24E-A45E-S101E-N109E-N118R-K213R，S24E-A45E-S101E-N109E-N118E-K213R，S24E-A45E-S101E-N109E-N118E-K213E，S24Q-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q-L217Q，和S24Q-A45Q-S101Q-N109Q-N118Q-K213Q-L217E的两个或多个位置处，其中所述位置对应于SEQ ID NO：1的BPN’枯草杆菌蛋白酶的位置。

5.在另外的实施方案中，所述蛋白酶变体是具有蛋白水解活性的芽孢杆菌属枯草杆菌蛋白酶FNA的分离的枯草杆菌蛋白酶变体的成熟形式，并且包含替换K213Q，其中所述位置通过对应于如SEQ ID NO：1所述的解淀粉芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶BPN’的氨基酸序列而进行编号。

6.分离的核酸，其编码如权利要求1-5中任一项所述的枯草杆菌蛋白酶变体。

7.表达载体，其包含权利要求6所述的核酸。

8.宿主细胞，其包含如权利要求7所述的表达载体。