[发明专利]尖孢镰刀菌苦瓜专化型的分子标记及其应用有效
| 申请号： | 201310031666.9 | 申请日： | 2013-01-28 |
| 公开（公告）号： | CN103060322A | 公开（公告）日： | 2013-04-24 |
| 发明（设计）人： | 陈振东;黄如葵;黎起秦;黄熊娟;袁高庆;黄玉辉;林纬 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区农业科学院蔬菜研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530007 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 镰刀 苦瓜 专化型 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种尖孢镰刀菌苦瓜专化型的RAPD标记S58-519，其特征在于具有序列表SEQ.ID.No.1的碱基序列。
2.根据权利要求1所述尖孢镰刀菌苦瓜专化型的RAPD标记S58-519在病原菌鉴别及发病组织检测中的应用。
3.一种尖孢镰刀菌苦瓜专化型的SCAR标记SCAS58-519，其特征在于具有序列表SEQ.ID.No.2的碱基序列。
4.根据权利要求3所述的尖孢镰刀菌苦瓜专化型的SCAR标记SCAS58-519，其特征在于扩增该标记的引物对具有序列表SEQ.ID.No.3和SEQ.ID.No.4的碱基序列。
5.根据权利要求4所述尖孢镰刀菌苦瓜专化型的SCAR标记SCAS58-519在病原菌鉴别及发病组织检测中的应用。
6.一种尖孢镰刀菌苦瓜专化型PCR快速检测方法，其特征在于PCR反应体系中含有序列表SEQ.ID.No.3和SEQ.ID.No.4的碱基序列的引物对Primer 1和Primer 2。
7.根据权利要求6所述的尖孢镰刀菌苦瓜专化型PCR快速检测方法，其特征在于该检测方法PCR反应的反应体系和扩增程序分别为：
反应体系共25μL：12.5μL2×Es Taq MasterMix，内含2×Es Taq PCR Buffer、3mMMgCl2，Es Taq Polymerase和400μM dNTP Mix；1.0μL浓度10μmol·L-1的Primer1，1.0μL浓度10μmol·L-1的Primer2；2.0μL浓度15ng/μL的模板DNA，8.5μL ddH2O；
扩增程序：94℃预变性5min；94℃变性1min，58℃退火30s，72℃延伸1min，共30个循环；72℃延伸10min，4℃保存备用。
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