[发明专利]一种判定微管相关蛋白1轻链3蛋白斑点类型的方法

权利要求书

1.一种判定微管相关蛋白1轻链3蛋白斑点类型的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将荧光蛋白（FP）与微管相关蛋白1轻链3（LC3）蛋白融合，转染并表达于哺乳动物细胞中；

（2）对步骤（1）得到的哺乳动物细胞进行处理，使哺乳动物细胞内形成荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3蛋白（FP-LC3）斑点；

（3）对步骤（2）得到的FP-LC3斑点进行分析，若FP-LC3与哺乳动物细胞胞浆中的FP-LC3存在完全、快速的交换行为，则FP-LC3斑点的类型为蛋白聚集体；若FP-LC3与哺乳动物细胞胞浆中的FP-LC3存在少量或者不存在交换行为，则FP-LC3斑点的类型为自吞噬结构。

2.根据权利要求1所述的判定微管相关蛋白1轻链3蛋白斑点类型的方法，其特征在于，所述步骤（3）中，分析方法为荧光漂白后恢复（FRAP）方法。

3.根据权利要求1所述的判定微管相关蛋白1轻链3蛋白斑点类型的方法，其特征在于，所述FRAP方法为：对FP-LC3斑点进行FRAP分析，如果检测FP-LC3斑点的荧光信号的半恢复时间<1s，恢复程度>80%，则表明该FP-LC3斑点是蛋白聚集体。

4.根据权利要求1所述的判定微管相关蛋白1轻链3蛋白斑点类型的方法，其特征在于，所述步骤（3）中，分析方法为荧光激活后重分布（FRAPa）方法。

5.根据权利要求4所述的判定微管相关蛋白1轻链3蛋白斑点类型的方法，其特征在于，所述FRAPa方法为：对FP-LC3斑点进行FRAPa分析，如果检测FP-LC3斑点的荧光信号的半衰减时间<2s，衰减程度>60%，则表明该FP-LC3斑点是蛋白聚集体。

6.根据权利要求1所述的判定微管相关蛋白1轻链3蛋白斑点类型的方法，其特征在于，所述步骤（3）是利用荧光显微镜进行观察。