[发明专利]一种红曲霉液态发酵曲的生产方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物发酵领域，尤其涉及一种红曲霉液态发酵曲的生产方法。

背景技术

红曲霉是一种腐生丝状真菌，属红曲科。将红曲霉应用于酿酒已有相当长的历史，主要是利用红曲霉代谢产生的红曲色素、各种酶以及多种生理活性物质，如麦角固醇、Monacolin K 和 γ-氨基丁酸等，不仅营养丰富，而且具有抗氧化、抗衰老、降血压、降胆固醇、参与机体代谢和免疫调节等生理功效。此外，红曲霉在代谢过程中还会产生一种真菌毒素——桔霉素，桔霉素主要作用的靶器官是肾脏,它不仅可以致畸、导致肿瘤的发生,而且可以诱发突变，使得红曲产品的食用安全性受到严重挑战，生产无桔霉素或低桔霉素含量的红曲产品具有重要的现实意义。

福建红曲黄酒作为我国黄酒产业的一朵奇葩，因添加了红曲进行发酵而有与众不同的功效。红曲是以大米为主要原料，经红曲霉固态发酵而成的一种紫红色米曲，在福建红曲黄酒酿造中有着举足轻重的作用，赋予红曲黄酒独特的风味和药用保健价值。固态发酵作为传统红曲的生产方式，具有培养基简单、成本低、对环境污染少、能耗低等优点，但是其抗微生物污染能力低、劳动强度大，操作繁琐，生长速度慢、生产周期长且产品质量稳定性不高而不适宜大规模机械化生产。

发明内容

为了克服现有红曲制备技术的缺点与不足，本发明提供了一种红曲霉液态发酵曲的生产方法，该方法是一种高产糖化酶、低产桔霉素的红曲霉液态发酵曲的生产方法，以期应用于红曲黄酒酿造。液态发酵是工业化生产的前提，相比于固态发酵具有可操控强、能实现液态发酵生产红曲，对红曲黄酒工艺稳定性、机械化生产都有很大的促进作用。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：

本发明的一种红曲霉液态发酵曲的生产方法，所述红曲霉名称为红曲霉菌株L（Monascus kaoliang Strains L），于中国典型培养物保藏中心保藏，保藏日期为2013年1月22日，保藏编号为：CCTCC M 2013039。

所述生产方法包含以下的步骤：

①菌株活化：取权利要求1所述的红曲霉菌株L保藏菌种，在无菌条件下，挑取少许菌种转接到PDA培养基上，活化培养；

②挑取活化好的菌种转接到种子培养基中，培养发酵种子，得到发酵种子液；

③在发酵培养基中接入上述发酵种子液，进行液态发酵；

④发酵完毕，测定发酵液的糖化酶活力、色价和桔霉素含量。

所述液态发酵的具体步骤如下：取发酵培养基30～50mL于250mL三角瓶装中，按3～8%接种量移取种子培养液于发酵培养基中，在32～36℃培养箱中，200-250 rpm/min 旋转振荡培养5～7天。

更优选的，所述生产方法包括以下具体步骤：

① 取权利要求1所述的红曲霉菌株L保藏菌种，在无菌条件下，挑少许菌种，转接于含PDA培养基的培养皿中，30℃活化培养8天；

② 用打孔器打取PDA平板上的红曲霉菌落转接到种子培养基中，摇床转速200rpm/min，温度30℃培养60h，制得种子培养液；

③ 250mL三角瓶装发酵培养基30mL，以体积比计，按5%的接种量移取种子培养液于发酵培养基中，在32℃恒温培养箱中，250rpm/min 旋转振荡培养6天；

④ 发酵液匀浆后，测定发酵液糖化酶活力、色价和桔霉素含量。

所述PDA培养基的配方如下：称取200g去皮切块的马铃薯，加入20g琼脂，20g葡萄糖，1000 mL去离子水，煮沸20～30 min，八层纱布过滤，混匀、分装、121℃灭菌30min。

所述种子培养基的配方如下(g.L^-1)：籼米粉35，葡萄糖12，黄豆粉12，NaNO₃ 1，KH₂PO₄ 1，MgSO₄.7H₂O 0.5， pH自然，121℃灭菌20min。

所述发酵培养基的配方如下(g.L^-1)：米粉30～50，葡萄糖10～20，味精20～30，硫酸铵10～15，磷酸二氢钾2～3，七水合硫酸镁0.4～0.7，一水合硫酸锰0.05～0.07，pH 6.5，121℃灭菌20min。

所述液态发酵的具体步骤如下：取发酵培养基30～50mL于250mL三角瓶装中，按3～8%接种量移取种子培养液于发酵培养基中，在32～36℃培养箱中，200-250 rpm/min 旋转振荡培养5～7天。