[发明专利]一种直投式霉豆渣发酵剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种直投式霉豆渣发酵剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）培养基的配制

麸皮培养基：按每克麸皮加（1.25～1.5）mL水的比例混匀，以重量计，外加0.5～2%葡萄糖，0.1～0.3%氯化钙，0.05～0.1%硫酸铜，0.05～0.1%硫酸铵混匀，在121℃条件下，杀菌15～20min，得到无菌的麸皮培养基；

（2）单一菌种的培养

将雅致放射毛霉孢子悬浮液按10³～10⁵个/mL接入麸皮培养基，26～30℃条件下培养4～5d后，加入无菌生理盐水振摇，至菌丝开始剥落，无菌生理盐水开始混浊后，经过滤、离心收集孢子；

在YPD培养基接入5～7%体积分数的运动发酵单胞菌菌悬液，28～30℃条件下摇床培养18～20h，离心收集菌体；

（3）单一菌剂的制备

将雅致放射毛霉孢子、运动发酵单胞菌体分别与已灭菌的含脱脂奶粉、麦芽糊精和蔗糖的冻干保护剂混合后，进行预冷冻处理，最后分别进行真空冷冻干燥，得到雅致放射毛霉菌剂、运动发酵单胞菌剂；

（4）混合发酵剂的制备

将雅致放射毛霉菌剂和运动发酵单胞菌剂混合，即制得直投式霉豆渣发酵剂。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，

所述雅致放射毛霉菌剂中的冻干保护剂为脱脂乳10%，蔗糖3～5%，麦芽糊精3～5%，谷氨酸钠5～7%，山梨醇5～7%；

所述运动发酵单胞菌剂中的冻干保护剂为10%脱脂乳、5～7%麦芽糊精、3～5%蔗糖、3～7%谷氨酸钠和5～7%山梨醇。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述雅致放射毛霉菌剂和运动发酵单胞菌剂制备中预冷冻处理的温度为-18℃，预冷冻时间7～8h；真空冷冻干燥的温度为-60℃，冻干时间20～24h。

4.根据权利要求1或2或3所述的方法，其特征在于，所述雅致放射毛霉菌剂和运动发酵单胞菌剂混合的体积比为（0.5～1）：（1～2）。

5.根据权利要求1或2或3所述的方法，其特征在于，所述雅致放射毛霉孢子的离心转速为3000～8000r/min，时间5～10min；所述运动发酵单胞菌的离心转速为3000～8000r/min，时间10～20min。

6.根据权利要求1或2或3所述的方法，其特征在于，所述YPD培养基的组分为：2～3%的蛋白胨、1～2%的葡萄糖、1～2%酵母膏。

7.由权利要求1～6任意一项方法制备的的直投式霉豆渣发酵剂。

8.权利要求7所述直投式霉豆渣发酵剂的应用，其特征在于，将直投式霉豆渣发酵剂接入灭菌的豆渣中发酵，即可制得霉豆渣。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：

（1）新鲜的湿豆渣经水洗后压榨至含水质量为60～75％；

（2）将经过压榨的豆渣分层放入蒸柜，常压下蒸煮15～20min；

（3）蒸料完成后冷却至室温，将直投式霉豆渣发酵剂用生理盐水于室温下活化30min，将直投式霉豆渣发酵剂接种入蒸煮过的豆渣，搅拌均匀后取豆渣压成球状，然后进行发酵即可。

10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于，所述直投式霉豆渣发酵剂的接种量为0.02～0.1%；所述发酵条件为：26～30℃发酵3～6d，相对湿度控制在90～95%。