[发明专利]一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法

权利要求书

1.一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法，其特征在于：包括如下步骤，

（1）培育宿主植物苗，具体如下，

A、采集、遴选宿主植物种子；

所述宿主植物选用云南松、华山松、板栗之一种；

B、处理宿主植物种子；

将步骤A收集的种子水选去出空壳，用30％的H₂O₂浸泡处理40分钟后，用蒸馏水冲洗，直至无H₂O₂气味为止；

C、制备培养基；

将蛭石与泥炭土按体积比1：1混合装入育苗框内，经高温121-126℃高压1.5kg/cm²灭菌2小时以上，形成无菌基质育苗框；

D、培育宿主植物；

将经步骤B处理后的植物种子及时播入无菌基质育苗框内，然后放置于温室内催芽，出芽后移入大棚育株，直至长出根苗；

（2）制备菌剂，具体如下，

A、收集和保存菌种；

采集夏块菌子实体，先用刷体轻轻洗净表面泥土，再在 75％的酒精中浸泡 3min对其表面灭菌，同时再在酒精灯火焰上快速灼烧，继续灭菌，然后置于经高温高压灭菌后的河沙中，于3-5℃的温度下冷藏保存备用，所述河沙采用高温121-126℃高压1.5kg/cm²灭菌2小时以上；

B、制备菌剂；其配制方法如下，

第一步，先称取一定量的块菌，用75％的酒精中浸泡 1-3分钟对其表面灭菌，然后再在酒精灯火焰上快速灼烧，继续灭菌，置于灭菌后的操作台上，用酒精灭菌后的打浆机将其粉碎成粒径小于lmm悬浮液，使菌种的孢子出壳，悬浮液中块菌与蒸馏水体积比为1：5；

第二步，将高吸水性丙烯酸树脂与块菌悬浮液按体积比1：400配制；

第三步，将吲哚乙酸速溶后配制60PPM浓度的蒸馏水溶液；

第四步，将第二步制作的悬浮液与第三步制作的蒸馏水溶液按体积比1:1配制成块菌接种剂；

（3）接种，采用悬浮液接种法，具体如下，

A、整理育好的宿主植物苗，减去多余的根、叶；

B、在接种杯内填入经消毒杀菌的无菌土，无菌土填装量约占接种杯容积的1/3，再将宿主植物苗放入杯中央；

C、向宿主植物苗根部撒上块菌悬浮液菌剂，使之附着在根系上；

D、装填接种培育基质，将根系覆盖；

（4）炼苗；

刚接种块菌的植株先放置于温度在15-25℃之间，基质的湿度保持在50-80％的炼苗室内育苗架上培育15-30天，使菌种在宿主上寄生成功；

（5）培育菌根苗；

将已经寄生成功的植株移出到玻璃大棚的育苗架上培育6-24个月，成为可供大田栽培的商品苗。

2.根据权利要求1所述一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法，其特征在于：所述无菌苗培育的步骤C中，所述云南松、华山松种子均匀撒播在育苗框内，上覆1cm灭菌基质，而板栗种子采用点播在育苗框内，上覆2-3cm灭菌基质，用清水将基质浇透后放置于温度25℃的温室中进行催芽，待80％以上的种子发芽后再移入温度为10-35℃的大棚中进行植株培育，同时将基质的湿度保持在50－80％。

3.根据权利要求1所述一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法，其特征在于：所述菌剂制备步骤中，菌种的一般保存期为1-3个月；若长期保存，要置于-18℃的冷冻室内真空保存。

4.根据权利要求1所述一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法，其特征在于：所述接种步骤D中，所述接种培育基质使用高温121-126℃高压1.5kg/cm²灭菌2小时以上的无菌基质，根据树种的差异，云南松宜采用的泥炭土与蛭石比例按体积比1：1混合；华山松和板栗宜采用的自然土与蛭石比例按体积比1：1混合；基质的PH值用生石灰调节，维持在7.5。

5.根据权利要求1所述一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法，其特征在于：所述遴选宿主植物种子的方法是，云南松和华山松用水选去除空壳后晾干后常温储藏备用；板栗种子水选去除霉烂和不饱满的种子，晾干表面水分，再与湿度为25－35％的洁净河沙按体积比1：2的比例混合，并置于5℃的冰箱中保存备用。

6.根据权利要求1所述一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法，其特征在于：所述人工接种的步骤C中，所述接种量2-5g／株。