[发明专利]一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种菌根苗人工接种培育方法，尤其涉及一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法。

背景技术

块菌通常与林木根系具有共生关系，是重要的野生食用菌，其子囊果含有较高的营养成分, 商业价值为世人所瞩目。法国、意大利的黑孢块菌(Tuber melanosporum)和白块菌(Tuber magnatum)在国际市场上价格贵如白金，并已经成为当地文化的重要组成部分。夏块菌(拉丁学名：tube aestivum vitt.)，子囊果呈不规则球形，基部常有凹陷，直径3-6cm，表面具有5-6边的角形疣凸，疣的直径可达0.5cm，较黑孢块菌和印度块菌子囊要表面特征明显。内部(孢体)苍白色，后呈奶油色或褐黄色，内有相互交连和分枝的脉络。

国内目前已经发现了印度块菌、夏块菌、白块菌等20余种块菌种类，主要分布于我国西南各省，出产季节为每年的10月一第2年2月，幼时白色至灰白色，成熟呈黑色或者褐色，具有清晰的乳白色菌脉，食之味美，含有丰富的蛋白质及多种维生素，尤其是维生素A、维生素B2含量极高。由于块菌的生长必需与合适的宿主植物根系营共生生活，否则将无法形成子囊果，这就意味着人工栽培块菌离不开活体宿主植物，因而块菌人工栽培比较困难，技术含量高，要实现块菌的人工栽培必须首先突破菌根南的培育技术。国内虽然对我国的中国块菌和印度块菌在生理生态方面的研究较多，对其块菌菌根首合成培育技术也有初步研究和报道。但是，技术在实验室操作性过多，生产操作性不强，而且夏块菌菌根苗培育技术鲜有见报道。

接近的专利发明《一种块菌与菌根合成方法》，专利申请号200810058447.9

存在问题一：《一种块菌与菌根合成方法》供试树种单一，块菌菌种单一。方法中只涉及了针叶树种，未涉及阔叶树种；方法中只涉及了中国块菌，即印度块菌，未涉及国际公认价值较高的夏块菌、白块菌。

存在的问题二：无菌苗培育。《一种块菌与菌根合成方法》中无菌苗基质采用灭菌1小时的珍珠岩和蛭石（1/1混合），能够保证苗木培育中的透水性，但不能解决苗木生长的养分营养需求问题，苗木生长缓慢，并且基质灭菌时间不够，容易出现污染。而且无菌苗培育应该在高架相对封闭的温室内进行培育，才能保障无菌苗培育过程中不受其它杂菌尤其是真菌的侵染。

存在的问题三：《一种块菌与菌根合成方法》中接种基质配方为腐殖质、水、蛭石1/1/1混合，PH值调整到7.0。实际上不同树种间基质配比差异性较大，就印度块菌的华山松菌根苗而言，过筛红土与蛭石按1/1混合效果好得多，而土壤PH值调整应当在6.5-7.0的区间范围内。

存在的问题四：《一种块菌与菌根合成方法》菌剂制备和接种技术苗圃操作性不强，易造成2次污染。一是块菌子囊果取出后，未对其表面灭菌，其子囊果表面可能含有的其它真菌和泥土是不能无菌水洗掉的，可能造成菌根苗的直接污染。二是接种方式采取的是蘸根，接种液的浓度也偏小，蘸取过程中因为根系发育等不一致，将造成接种各苗之间孢子量不对称。

存在的问题五：《一种块菌与菌根合成方法》缺乏炼苗过程。《一种块菌与菌根合成方法》中菌根苗培育是直接放置在自然通风的大棚内进行，在苗木培育初始的15-30天，需要相对空间无菌的空间进行炼苗，块菌菌根形成效果会更稳定，杜绝初期受外界杂菌的竞争影响。

发明内容

本发明的目的就在于提供一种解决上述问题，针对夏块菌菌根苗的人工接种培育方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种悬浮液接种培育夏块菌根苗的方法，包括如下步骤，

（1）培育宿主植物苗，具体如下，

A、采集、遴选宿主植物种子；

所述宿主植物选用云南松、华山松、板栗之一种；

B、处理宿主植物种子；

将步骤A收集的种子水选去出空壳，用30％的H₂O₂浸泡处理40分钟后，用蒸馏水冲洗，直至无H₂O₂气味为止；

C、制备培养基；

将蛭石与泥炭土按体积比1：1混合装入育苗框内，经高温121-126℃高压1.5kg/cm²灭菌2小时以上，形成无菌基质育苗框；

D、培育宿主植物；

将经步骤B处理后的植物种子及时播入无菌基质育苗框内，然后放置于温室内催芽，出芽后移入大棚育株，直至长出根苗；

（2）制备菌剂，具体如下，

A、收集和保存菌种；