[发明专利]一种辣根过氧化物酶黑色显色剂及其制备方法与应用有效
申请号: | 201310036049.8 | 申请日: | 2013-01-20 |
公开(公告)号: | CN103323448B | 公开(公告)日: | 2018-01-16 |
发明(设计)人: | 李湘麒;谭毅;张弛;梁广 | 申请(专利权)人: | 温州医科大学 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司44245 | 代理人: | 裘晖 |
地址: | 325035 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 辣根过氧化物酶 黑色 显色 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种辣根过氧化物酶黑色显色剂的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)以水为溶剂分别配制:无水乙醇溶解的25mg/mL 4-氯-1-萘酚(4-CN),50mg/mL 3,3’-二氨基联苯胺(DAB),0.1M醋酸铵溶解的50mg/mL硫酸镍铵,0.5g/mL氯化钴,0.5g/mL咪唑,1M硼酸,20mg/mL MgCl2,20mg/mL MnCl2,25mg/mL亚硝基铁氰化钠,12mg/mL甜菜碱,2mg/mL明胶,0.2g/mL硫酸葡聚糖,1%(V/V)四氢呋喃,1%(V/V)丙酮;
(2)取25mg/mL 4-CN 2.5μL,50mg/mL DAB 2.5μL,50mg/mL硫酸镍铵5μL,0.5g/mL氯化钴0.5μL,0.5g/mL咪唑0.5μL,1M硼酸1μL,20mg/mL MgCl2 1μL,20mg/mL MnCl2 1μL,25mg/mL亚硝基铁氰化钠1μL,12mg/mL甜菜碱1μL,2mg/mL明胶1μL,0.2g/mL硫酸葡聚糖1μL,1%(V/V)四氢呋喃1μL,1%(V/V)丙酮1μL,聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)1μL,30wt%H2O2 1μL,1×TBS缓冲液979μL混匀得到辣根过氧化物酶黑色显色剂。
2.一种辣根过氧化物酶黑色显色剂,其特征在于:通过权利要求1所述的制备方法制备得到。
3.根据权利要求2所述的辣根过氧化物酶黑色显色剂,其特征在于:所述的辣根过氧化物酶黑色显色剂的最终显色产物为黑色沉淀。
4.权利要求2或3所述的辣根过氧化物酶黑色显色剂在核酸/蛋白检测中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述的辣根过氧化物酶黑色显色剂用于辣根过氧化物酶显色。
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