[发明专利]食品中壬基酚的测定方法

权利要求书

1.食品中壬基酚的测定方法，其特征是包括以下步骤： 

1）、试样制备：

将待测品制成待测样品；

2）、提取：

称取待测样品2.0g加入离心管内，加入18~22mL正己烷和丙酮混合溶剂，振荡提取、超声波提取、离心后，得首次上清液和沉淀； 

在沉淀中加入8~12mL正己烷和丙酮混合溶剂，重复上述振荡提取、超声波提取和离心；得再次上清液；

合并首次上清液和再次上清液，得合并上清液，取1/3体积的合并上清液45~55℃氮吹干，二氯甲烷溶解，得待净化提取液；

所述正己烷和丙酮混合溶剂由正己烷和丙酮按照1:1的体积比混合而得；

3）、净化：

取活化后的氨基固相萃取柱，转移上述待净化提取液上柱，先加入正己烷淋洗，吹干氨基固相萃取柱后，加入甲醇丙酮混合液洗脱，收集洗脱液，将所收集的洗脱液于48~52℃氮气吹干，用流动相溶解并定容至1mL，过0.45μm有机相滤膜，得样品提取液；所述样品提取液用于下述步骤的高效液相色谱仪测定；

所述流动相同步骤4）中的高效液相色谱检测用流动相；

4）、将步骤3）所得的样品提取液与壬基酚标准工作溶液分别进行高效液相色谱测定；

高效液相色谱测定条件如下：

所用色谱柱为EclipseXDB C18，5μm，150mm×4.6mm内径；

高效液相色谱检测用流动相由体积百分比70％的组分A和体积百分比30％的组分B，所述组分A为乙腈，所述组分B为水；

分别测得样品提取液和壬基酚标准工作溶液的峰面积；

利用壬基酚标准工作溶液的峰面积和壬基酚标准工作溶液中壬基酚浓度获知壬基酚浓度/峰面积的线性相关性关系，以及利用样品提取液的峰面积，得知样品提取液中壬基酚的浓度；再根据待测样品与样品提取液的比例关系，换算获得待测样品中壬基酚的浓度。

2.根据权利要求1所述的食品中壬基酚的测定方法，其特征是：

壬基酚标准工作溶液中壬基酚的浓度为在1ng/mL～0.5mg/mL。

3.根据权利要求2所述的食品中壬基酚的测定方法，其特征是：

壬基酚浓度/峰面积的线性相关性关系：y=0.13x+0.41；

所述y为峰面积，x为壬基酚浓度，单位ng/ml。

4.根据权利要求1、2或3所述的食品中壬基酚的测定方法，其特征是：

当待测品为谷类时，将谷类制成过40目筛的粉末， 作为待测样品；

当待测品为鱼类时，将待测品制成糜状物，作为待测样品；

当待测品为蔬菜、蔬菜制品，将待测品匀浆，得浆液；加入无水硫酸钠将浆液进行浓缩处理，使浓缩后的浆液=待测品的重量；所述浓缩后的浆液作为待测样品。

5.根据权利要求4所述的食品中壬基酚的测定方法，其特征是：

所述步骤4）中的高效液相色谱中荧光检测波长为激发波长222nm，发射波长305nm。

6.根据权利要求5所述的食品中壬基酚的测定方法，其特征是：

所述步骤2）中：

在15~25mm震荡幅度下的震荡提取时间为15~25min；

在30~50KHz的超声频率和80~120W的功率下超声波提取15~25min。

离心的转速为4000~6000r/min，离心时间8~12min。

7.根据权利要求6所述的食品中壬基酚的测定方法，其特征是：步骤3）中甲醇丙酮混合液、正己烷体积均为4~8mL。

8.根据权利要求7所述的食品中壬基酚的测定方法，其特征是：所述步骤2）中所用的离心管为具塞离心管。