[发明专利]食品中壬基酚的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种食品中壬基酚的测定方法，特别是食品中壬基酚浓度的测定方法。

背景技术

壬基酚是一种对人体有严重危害的一类环境污染物，目前被广泛应用于食品相关产品生产中，如用作清洁剂、油漆和杀虫剂等的原料，还可作为食品工业生产中的抗氧化剂。我国目前壬基酚的年生产能力3万吨，产量为2.6万吨，近几年我国壬基酚进口量维持在年2万吨左右。

据统计，全世界每年约有50万吨的壬基酚进入水体或土壤。由于壬基酚的高度疏水性及化学性质稳定，使得其易在水体下的淤泥中蓄积造成在环境中的广泛分布，并能通过食物链进行富集，从而通过食物对人类造成危害。研究发现壬基酚可以从牛奶加工过程中的PVC管以及包装食品的塑料中渗出，这些壬基酚大部分直接进入牛奶中，还有一部分释放到环境中后，很难被降解掉，累积在污水污泥、流水沉积物、甚至一些饮用水中，水体中的壬基酚污染还可富集在水生动物中，通过食物链对人体产生作用。

大量体内、外试验表明壬基酚作为一种环境雌激素，具有干扰内分泌活性的作用，对哺乳动物与水生生物的生殖与发育造成了不同程度的影响，已经引起了毒理学、生态学、环境流行病学等方面科学家的广泛关注。目前相关研究主要集中在其环境行为及其可能的相关生态环境风险方面，有关食品中壬基酚的检测技术目前还比较缺乏。大量研究表明，这些化合物广泛地存在于各种食品中，对人类有着长期的危险，与其他雌激素类物质的协同效应也是其严重危害后果之一。

针对壬基酚的检测，国内外尚有对环境中壬基酚含量的检测方法，但较少有具体在食品中的检测。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种检出限低、回收率高、重现性好、利用高效液相色谱法测定食品中壬基酚的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种食品中壬基酚的测定方法，包括以下步骤： 

1）、试样制备：

将待测品制成待测样品；

2）、提取：

称取待测样品2.0g加入离心管内，加入18~22mL正己烷和丙酮混合溶剂，振荡提取、超声波提取、离心后，得首次上清液和沉淀； 

在沉淀中加入8~12mL正己烷和丙酮混合溶剂，重复上述振荡提取、超声波提取和离心；得再次上清液；

合并首次上清液和再次上清液，得合并上清液，取1/3体积的合并上清液45~55℃（最佳为50℃）氮吹干（吹至近干），二氯甲烷溶解，得待净化提取液；

正己烷和丙酮混合溶剂由正己烷和丙酮按照1:1的体积比混合而得；

备注说明：上述二氯甲烷的用量为只需能溶解“被45~55℃氮吹至近干的1/3体积的合并上清液”即可；一般为2~4ml，例如为3ml；

3）、净化：

取活化后的氨基固相萃取柱，转移上述待净化提取液上柱，先加入正己烷淋洗，吹干（近干）氨基固相萃取柱后，加入甲醇丙酮混合液洗脱，收集洗脱液，将所收集的洗脱液于48~52℃（最佳为50℃）氮气吹干，用流动相溶解并定容至1mL，过0.45μm有机相滤膜，得样品提取液；所述样品提取液用于下述步骤的高效液相色谱仪测定；

所述流动相同步骤4）中的高效液相色谱检测用流动相；

备注说明：过0.45μm有机相滤膜，几乎不会导致体积的改变，即，所得的样品提取液仍为1 mL；

4）、将步骤3）所得的样品提取液与壬基酚标准工作溶液分别进行高效液相色谱测定；

高效液相色谱测定条件如下：

所用色谱柱为EclipseXDB C18，5μm，150mm×4.6mm内径；

高效液相色谱检测用流动相由体积百分比70％的组分A和体积百分比30％的组分B，组分A为乙腈，组分B为水；

分别测得样品提取液和壬基酚标准工作溶液的峰面积；

利用壬基酚标准工作溶液的峰面积和壬基酚标准工作溶液中壬基酚浓度获知壬基酚浓度/峰面积的线性相关性关系，以及利用样品提取液的峰面积，得知样品提取液中壬基酚的浓度；再根据待测样品与样品提取液的比例关系，换算获得待测样品中壬基酚的浓度（即，待测品中壬基酚的浓度）。

作为本发明的食品中壬基酚的测定方法的改进：

壬基酚标准工作溶液中壬基酚的浓度为在1ng/mL～0.5mg/mL。

作为本发明的食品中壬基酚的测定方法的进一步改进：

壬基酚浓度/峰面积的线性相关性关系：y=0.13x+0.41；

y为峰面积；x为壬基酚浓度，单位ng/ml。

作为本发明的食品中壬基酚的测定方法的进一步改进：