[发明专利]植物质膜蛋白再溶解的方法及其在双向荧光差异凝胶电泳中的应用无效

申请号：	201310041325.X	申请日：	2013-02-01
公开（公告）号：	CN103130866A	公开（公告）日：	2013-06-05
发明（设计）人：	李银心;聂玲玲;陈显扬;郭杰;范鹏祥	申请（专利权）人：	中国科学院植物研究所
主分类号：	C07K1/02	分类号：	C07K1/02;C07K1/30;G01N27/447
代理公司：	北京纪凯知识产权代理有限公司 11245	代理人：	关畅
地址：	100093 北京市海淀区香山南***	国省代码：	北京;11
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摘要：
搜索关键词：	植物质膜蛋白溶解方法及其双向荧光差异凝胶电泳中的应用
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【权利要求书】：

1.一种植物质膜蛋白再溶解的方法，包括如下步骤：将植物质膜蛋白加入裂解液中，在冰浴中超声处理，然后涡混使所述植物质膜蛋白溶解，最后离心收集上清液，即为植物质膜蛋白溶液；所述裂解液是在DIGE裂解缓冲液中加入N-十二烷基-β-D-麦芽糖苷得到的，所述N-十二烷基-β-D-麦芽糖苷在所述裂解液中的浓度为0.5-2g/100mL。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述N-十二烷基-β-D-麦芽糖苷在所述裂解液中的浓度为1g/100mL。

3.一种制备用于进行2-D DIGE的植物质膜蛋白溶液的方法，是将植物质膜蛋白用权利要求1或2所述的方法进行再溶解，得到植物质膜蛋白溶液。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述植物质膜蛋白的制备方法依次包括如下步骤：

（1）在植物质膜悬浮液中加入冰甲醇，涡混4-10min后离心；

（2）加入氯仿，涡混4-10min后离心；

（3）加入ddH₂O，涡混4-10min后离心，弃除最上面的一层；

（4）加入冰甲醇，涡混4-10min后离心，收集沉淀；

（5）用冰甲醇洗涤沉淀，得到植物质膜蛋白。

5.如权利要求1至4中任一所述的方法，其特征在于：所述植物为单子叶植物或双子叶植物。

6.如权利要求1至4中任一所述的方法，其特征在于：所述植物为甜土植物或盐生植物。

7.如权利要求1至4中任一所述的方法，其特征在于：所述植物为盐角草或拟南芥。

8.权利要求1至7中任一所述的方法在2-D DIGE中的应用。