[发明专利]鉴别或辅助鉴别花脸蘑原生质体单核体交配型的方法及其专用引物对IS-818

权利要求书

1.鉴别或辅助鉴别花脸蘑原生质体单核体交配型的方法，包括如下步骤：分别以待鉴别的两株花脸蘑原生质体单核体的基因组DNA为模板，用由SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的两条单链DNA组成的PCR引物对进行PCR扩增，检测所得到的PCR产物的大小，根据PCR扩增产物的大小按照下述方法确定所述待鉴别的两株花脸蘑原生质体单核体的交配型：

如果所述待鉴别的两株花脸蘑原生质体单核体的PCR产物均含有800bp-1000bp的DNA片段，所述待鉴别的两株花脸蘑原生质体单核体的交配型相同或候选为交配型相同，如果所述待鉴别的两株花脸蘑原生质体单核体的PCR产物均不含有800bp-1000bp的DNA片段，所述待鉴别的两株花脸蘑原生质体单核体的交配型相同或候选为交配型相同；如果所述待鉴别的两株花脸蘑原生质体单核体中的一株待鉴别的花脸蘑原生质体单核体的PCR产物含有800bp-1000bp的DNA片段，另一株待鉴别的花脸蘑原生质体单核体的PCR产物不含有800bp-1000bp的DNA片段，所述待鉴别的两株花脸蘑原生质体单核体的交配型不同或候选为交配型不同。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述800bp-1000bp的DNA片段为861bp的DNA片段。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增采用的引物退火条件为62℃退火30s。

4.根据权利要求1或2或3所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增中采用的PCR反应温度程序：94℃预变性5min；94℃变性30s，62℃退火30s，72℃延伸40s，30个循环；72℃延伸7min。

5.权利要求1-4中任一所述的方法在花脸蘑育种中的应用。

6.鉴别或辅助鉴别花脸蘑原生质体单核体交配型的PCR引物对，其特征在于：所述引物对的名称为IS-818，由SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的两条单链DNA组成。

7.含有权利要求6所述的PCR引物对的鉴别或辅助鉴别花脸蘑原生质体单核体交配型的试剂。

8.含有权利要求6所述的PCR引物对的鉴别或辅助鉴别花脸蘑原生质体单核体交配型的试剂盒。

9.权利要求6所述的PCR引物对、权利要求7所述的试剂或权利要求8所述的试剂盒在鉴别或辅助鉴别花脸蘑原生质体单核体交配型中的应用。

10.权利要求6所述的PCR引物对、权利要求7所述的试剂或权利要求8所述的试剂盒在花脸蘑育种中的应用。