[发明专利]一种活体检测猪肉风味的方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及畜牧学和分子生物学领域，具体涉及一种活体检测猪肉风味的方法及其应用。

背景技术

猪肉风味是衡量猪肉口感、多汁性以及是否好吃的重要指标，也是猪肉品质的重要性状，更是消费者关注的猪肉品质消费的基本问题。猪肉风味包括鲜味、甜味、酸味、膻味等等，受品种、年龄、性别、饲养工艺、饲料原料与配方、屠宰加工工艺及烹饪条件等影响。在相同环境条件下，不同品种的猪肉风味不同，烹调后的色、香、味及口感差之明显。因此，如何探测和准确选择有较好风味的种猪已成为猪遗传育种学研究的热点之一。目前，通过获得畜禽经济性状的功能基因及其标记，并利用其来加速畜禽重要经济性状的育种进展是动物遗传育种领域的重要创新。由于猪肉风味是影响猪肉消费者取舍的重要因素，采用分子生物学方法获得风味俱佳的猪育种方法还没有实质性突破。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种可用于活体检测猪肉风味的方法及其在育种上的应用。

一种用于活体检测猪肉风味的引物对，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。

一种活体检测猪肉风味的方法，包括如下步骤：

(1)分别提取待测猪的基因组DNA；

(2)以待测猪基因组DNA为模板，以序列表中SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的DNA分子为引物对，进行PCR扩增，NspI限制性内切酶酶切PCR扩增产物；

(3)检测NspI限制性内切酶酶切产物的大小，确定待测猪的基因型；

若酶切产物含有一条DNA片段，大小在200bp以上，则待测猪为BB基因型；

若酶切产物含有二条DNA片段，大小分别在100～200bp和小于100bp，则待测猪为AA基因型；

若酶切产物含有三条DNA片段，分别在200bp以上、100～200bp和小于100bp，则待测猪为AB基因型；

(4)确定猪肉风味与猪的基因型之间的相关性；

所述AA基因型的猪肉风味优于所述BB基因型和所述AB基因型的猪肉风味，表现为猪肉多汁、味香、口感好。

本发明所述活体检测猪肉风味的方法，其中所述检测NspI限制性内切酶酶切产物的大小的方法为琼脂糖凝胶电泳。

本发明所述活体检测猪肉风味的方法在猪的育种中的应用。

一种培育猪肉风味较佳的猪品系的方法，包括如下步骤：采用本发明所述活体检测猪肉风味的方法检测猪肉风味，获得AA基因型的猪，以所述AA基因型的猪为亲本进行育种获得猪肉风味较佳的猪。

本发明所述引物对在猪的育种中的应用。

含有本发明所述引物对的试剂盒，其中包括本发明所述方法的引物对，所述引物对如序列表中SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示，所述试剂盒还包括常用的10×PCR缓冲液、dNTPs、Taq DNA聚合酶、NspI限制性内切酶、超纯水等。

本发明活体检测猪肉风味的方法，能通过简单的PCR扩增和酶切确定待测猪的基因型，AA基因型猪的风味显著高于BB基因型和AB基因型(P＜0.01)，根据检测结果以AA基因型的猪进行育种可获得候选的优质风味的猪品系。本发明所述活体检测猪肉风味的方法简单易行，检测结果准确，精确度高，能很快地选出风味较佳的猪品系。通过本发明所述方法选出风味较佳的猪，可以避免直接宰杀猪，只需取得一部分组织(如表皮、耳组织、血液、毛发等)测定待测猪的基因型就可以知道其风味如何，在待测猪的任何发育时期都可以进行，省时省力，还可以早期选种，也避免了不必要的宰杀造成的浪费，也可为生猪产业活体按质定价提供依据。

下面结合附图及具体实施例对本发明所述方法作进一步说明。

附图说明

图1为NspI限制性内切酶对PCR产物进行酶切的图谱。

具体实施方式

实施例

一种可用于活体检测猪肉风味的方法，具体包括如下步骤：

一、分别提取待测猪的基因组DNA

分别提取地方品种猪和引入品种猪的基因组DNA，其中所述地方品种猪包括皖南黑猪、淮猪、皖南花猪、圩猪和太湖猪，引入品种猪包括长白猪、大白猪和杜洛克猪。

试验所用地方品种猪共97头(体重为80～85kg的肥育猪)、引入品种猪共66头(体重为95～100kg的肥育猪)，所述待检测猪采用同一饲养标准进行饲养。

二、基因型鉴定