[发明专利]生物转化法生产核苷类药物中间体阿糖胞苷的方法

权利要求书

1.一种生产阿糖胞苷的方法，是将瑞士乳杆菌种子液接入发酵培养基中发酵培养，得到粗菌体，加入缓冲液制成细胞悬浮液，向所述细胞悬浮液中加入底物阿糖尿苷和胞嘧啶进行生物转化反应，获得阿糖胞苷转化液。离心，调节溶液pH，柱层析，解析，浓缩得到高纯度阿糖胞苷。

2.根据权利要求所述的方法，其特征在于：采用生物转化法生产阿糖胞苷。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述发酵培养基由下列重量份的物质组成：酵母浸粉20-45，葡萄糖2-5，蛋白胨5-10，硫酸氨2-5，磷酸氢二钾5-10，玉米浆5-15，氯化钙1-5，水1000；所述发酵培养的温度为30-42℃，搅拌转速为120-160转/分钟，pH值为6.0-7.5，发酵时间为24-36小时。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述瑞士乳杆菌种子液与所述发酵培养基的体积比为10％-15％。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述瑞士乳杆菌种子液是按照如下方法获得：将瑞士乳杆菌接种到斜面培养基培养制成斜面菌种，将所述斜面菌种接入发酵培养基中培养获得种子液；所述斜面培养基由下列重量份的物质组成：酵母浸粉10-15份，葡萄糖1-2份，蛋白胨2-5份，磷酸氢二钾5-10份，玉米浆0.5-1份，氯化钠1-5份，琼脂15-20份和水1000份。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述瑞士乳杆菌接种到斜面培养基培养的温度为30-42℃，pH为6.5-8.0，培养24-48小时。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述细胞悬浮液按照如下方法制备：将所述粗菌体用柠檬酸缓冲液洗涤，然后用pH6.0-7.0磷酸缓冲液悬浮，获得细胞悬浮液。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述柠檬酸缓冲液的pH6.0-7.0；所述磷酸缓冲液的pH6.0，浓度为10-20mmol/L。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述生物转化反应的温度为35-65℃。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述底物阿糖尿苷加入浓度为20-40g/L，胞嘧啶加入浓度为10-20g/L。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述层析柱中的介质为离子交换树脂或大孔吸附树脂。