[发明专利]一种测定重组腺相关病毒滴度的定量PCR方法有效
| 申请号： | 201310046098.X | 申请日： | 2013-02-04 |
| 公开（公告）号： | CN103114152A | 公开（公告）日： | 2013-05-22 |
| 发明（设计）人： | 许瑞安;王峰;崔秀灵 | 申请（专利权）人： | 许瑞安 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京华科联合专利事务所 11130 | 代理人： | 杨厚;王为 |
| 地址： | 362021 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 测定 重组 相关 病毒 定量 pcr 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测重组腺相关病毒滴度的定量PCR方法，其特征是，所述方法系利用腺相关病毒基因组共有的空间构象末端重复序列ITR中的SmaI限制性酶切位点，通过SmaI酶切，消除影响定量PCR检测重组腺相关病毒滴度的干扰，再以酶切后的重组腺相关病毒DNA为模板进行实时定量PCR检测，具体实施步骤包括：
1）将重组腺相关病毒感染细胞，扩增制备重组腺相关病毒；
2）提取纯化重组腺相关病毒DNA；
3）用SmaI酶切处理腺相关病毒DNA，破坏ITR的构象；
4）以酶切后的重组腺相关病毒DNA为模板，用不同元件设计引物进行实时定量PCR检测重组腺相关病毒的滴度。
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