[发明专利]与PD-1和VEGF高效结合的融合蛋白、其编码序列及用途

权利要求书

1.一种分离的融合蛋白，其由如下肽段组成：

1)人类PD-L2的胞外区肽段；

2)人类FLT-1胞外区第2个免疫球蛋白样结构域的肽段或/和KDR胞外区第3个免疫球蛋白样结构域的肽段；以及

3)人类免疫球蛋白的Fc段；

其中：

所述人类PD-L2的胞外区肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；

所述人类FLT-1胞外区第2个免疫球蛋白样结构域的肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；

所述人类KDR胞外区第3个免疫球蛋白样结构域的肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示；

所述的Fc段不具有ADCC效应；

相对于1)和2)中所述的肽段，所述Fc段位于融合蛋白的靠近C末端的一侧；

所述人类PD-L2的胞外区肽段、人类FLT-1胞外区第2个免疫球蛋白样结构域的肽段和KDR胞外区第3个免疫球蛋白样结构域的肽段分别独立地为一个或两个拷贝。

2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于如下的(1)－(4)中的任一项或者多项：

(1)所述人类免疫球蛋白Fc段选自人类免疫球蛋白IgG各亚型、IgM或者IgA的全长Fc段；

(2)当为两个拷贝时，所述人类PD-L2的胞外区肽段、人类FLT-1胞外区第2个免疫球蛋白样结构域的肽段和KDR胞外区第3个免疫球蛋白样结构域的肽段为同源串联重复或间隔串联重复；

(3)所述融合蛋白还包含信号肽；

(4)所述人类PD-L2的胞外区肽段、人类FLT-1胞外区第2个免疫球蛋白样结构域的肽段和/或KDR胞外区第3个免疫球蛋白样结构域的肽段、人类免疫球蛋白的Fc段以及任选的信号肽之间为直接相连或通过1个或多个相同或者不同的Linker相连。

3.根据权利要求2所述的融合蛋白，其中，第(1)项中，所述人类免疫球蛋白IgG各亚型为IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。

4.根据权利要求2所述的融合蛋白，其中，第(1)项中，所述Fc段为IgG4的全长Fc段。

5.根据权利要求2所述的融合蛋白，其中，第(3)项中，所述信号肽的氨基酸序列如SEQID NO：9所示。

6.根据权利要求2所述的融合蛋白，其中，第(4)项中，所述Linker的氨基酸序列如SEQID NO：11或SEQ ID NO：13所示。

7.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：15至SEQ ID NO：18中的任一序列所示。

8.一种分离的多核苷酸，其编码权利要求1至7中任一权利要求所述的融合蛋白。

9.根据权利要求8所述的多核苷酸，其核苷酸序列如SEQ ID NO：19至SEQ ID NO：22中的任一序列或其简并性序列所示。

10.一种重组载体，其含有权利要求8或9所述的多核苷酸。

11.根据权利要求10所述的重组载体，其为质粒、重组腺病毒、重组腺相关病毒或噬菌体。

12.根据权利要求11所述的重组载体，其中所述质粒为真核表达质粒或原核表达质粒。

13.根据权利要求11所述的重组载体，其中所述质粒为pCDNA3.1、pDC315或pAAV-MCS。

14.一种重组宿主细胞，其包含权利要求10至13中任一权利要求所述的重组载体。

15.根据权利要求14所述的重组宿主细胞，其中，所述宿主细胞为细菌。