[发明专利]一种高山羊齿的繁育方法

说明书

技术领域

本发明属于花卉栽培技术领域，特别涉及蕨类植物繁殖技术领域。

背景技术

高山羊齿(Davallia mariesii)是骨碎补科骨碎补属的蕨类植物。原产危地马拉,于90年代作为切叶进入中国。是一种适合用作切叶的蕨类植物，目前大量应用于插花，其千姿百态的叶形、叶姿和青翠碧绿的色彩，使人赏心悦目。随着室内观赏植物的发展，其产品供应一直处于紧缺的状况。高山羊齿繁殖方法主要是分株繁殖和孢子繁殖，但分株繁殖数量少，易损坏株型，恢复很慢且受季节限制，不能在短期内获得大量种苗；孢子繁殖由于自然环境中孢子成苗率很低，影响了繁殖速度，同时这些方法用量大，还受到季节的限制，难以进行规模化、标准化生产和大面积的推广。因此探索一个快速有效的高山羊齿的繁育方法势在必行。而组培技术具有繁殖速度快、繁殖系数大、繁殖后代整齐一致、可周年进行生产等优点，因此利用组培技术进行高山羊齿的繁殖，能在短期内培育出大量种苗，目前，还没有对高山羊齿进行组培繁育的报道。

发明内容

本发明的目的是克服现有高山羊齿种苗繁殖技术存在材料要求高、用量大、难以规模化生产等缺陷和不足，提供一种能适宜高山羊齿工厂化组培快繁的方法及专用培养基，以满足高山羊齿优质种苗的大规模生产需要。

本发明提供的一种高山羊齿繁育的专用培养基，由以下两个培养基组成：

（1）诱导增殖培养基：

MS基本培养液

（2）生根培养基：

1/2MS基本培养液

所述的高山羊齿繁育的专用培养基还可以由以下两个培养基组成：

（1）诱导增殖培养基：

MS基本培养液

（2）生根培养基：

1/2MS基本培养液

本发明所提供的一种高山羊齿的繁育方法，包括以下步骤：

(1)取成熟期的高山羊齿孢子用纱布包好后，在超净环境下用质量分数为75%的酒精浸泡30-40s后，依次放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中消毒6min，次氯酸钠混合液中消毒10min，再用无菌水冲洗4～5次，每次2min，即获得高山羊齿无菌孢子，所述的次氯酸钠混合液是由次氯酸钠溶液加入吐温20混合而成，次氯酸钠溶液与吐温20的配比是：质量分数为2%的次氯酸钠溶液100ml中加入2滴吐温20；

(2)诱导和增殖培养：将步骤(1)获得的高山羊齿无菌孢子接入盛有下列诱导增殖培养基的培养瓶中：

MS基本培养液

在温度为25℃±2℃条件下暗培养15d～16d，转到光照强度为1500lx～2000lx，温度为25℃±2℃，光照时间为8～10h/d的条件下，继续培养至高山羊齿孢子萌发分化出绿色球状体，将绿色球状体切开；

(3)继代培养：将步骤(2)切开的绿色球状体转接到盛有与步骤(2)所述的诱导增殖培养基配方相同的新的诱导增殖培养基的培养瓶中，在光照强度为1500lx～2000lx，温度为25℃±2℃，光照时间为8～10h/d的条件下，继代培养25～30d后，再转接到盛有与步骤(2)所述的诱导增殖培养基配方相同的新的诱导增殖培养基的培养瓶中，并在与继代培养所述的相同的培养条件下继代培养25～30d，如此反复，待增殖基数达到所需的数量时，将培养出的苗转入步骤（4）培养；未成苗的绿色球状体转接到盛有与步骤(2)所述的诱导增殖培养基配方相同的新的诱导增殖培养基的培养瓶中，并在与继代培养所述的相同的培养条件下继续培养，待成苗后，将培养出的苗转入步骤（4）培养；

（4）生根培养基：将步骤（3）获得的苗接种到盛有下列生根培养基的培养瓶中：

1/2MS基本培养液

在光照强度为1500lx～2000lx，温度为25℃±2℃，光照时间为10～12h/d的条件下培养至植株基部长出根；

（5）将步骤（4）植株已长有根的培养瓶置于大棚内进行常规炼苗3～5d，再将培养瓶内的苗取出，按常规洗净苗上的培养基，放入质量分数为0.1～0.2%的多菌灵溶液中消毒1～2min后，移栽至装有下列基质的育苗袋中，所述基质由泥炭、腐质土、珍珠岩和蛭石混合而成，泥炭、腐质土、珍珠岩和蛭石的质量比为：泥炭：腐质土：珍珠岩：蛭石=7:3:1:0.5，在常规浇水和施肥管理条件下，生长40d后，即得高山羊齿移栽苗。