[发明专利]鲫鱼出血病生物防治方法及应用有效
| 申请号： | 201310050192.2 | 申请日： | 2013-02-08 |
| 公开（公告）号： | CN103272228A | 公开（公告）日： | 2013-09-04 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 无锡海健生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/106 | 分类号： | A61K39/106;A61K39/245;A61K48/00;A61P31/04;A61P31/22 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所 32104 | 代理人： | 殷红梅 |
| 地址： | 214092 江苏省无锡市滨湖*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鲫鱼 出血病 生物防治 方法 应用 | ||
1. 鲫鱼出血病生物防治方法，其特征在于：给养殖鲫鱼免疫接种多价载体疫苗；所述多价载体疫苗是利用基因工程方法得到的枯草芽孢杆菌重组菌株，该重组菌株的分类命名是枯草芽孢杆菌 HT5304（Bacillus subtilis HT5304），已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNo：M2013029。
2.如权利要求1所述的鲫鱼出血病生物防治方法，其特征在于：所述鲫鱼出血病是指由鲫鱼疱疹病毒（CyHV-2）和/或嗜水气单胞菌导致的鲫鱼出血病。
3.如权利要求1所述的鲫鱼出血病生物防治方法，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌重组菌株在形成芽孢后能够在芽孢表面展示嗜水气单胞菌3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）抗原蛋白。
4.如权利要求1所述的鲫鱼出血病生物防治方法，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌重组菌株的染色体上重组整合有以枯草芽孢杆菌衣壳蛋白基因cotB为分子载体并与嗜水气单胞菌3-磷酸甘油醛脱氢酶gapdh基因相融合所获得的cotB-gapdh融合基因片段（SEQ ID NO: 1），所述融合基因片段重组整合在枯草芽孢杆菌重组菌株染色体上的amyE基因位点，通过诱导该枯草芽孢杆菌重组菌株可产生能够表面展示嗜水气单胞菌3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）抗原蛋白的芽孢。
5.如权利要求1所述的鲫鱼出血病生物防治方法，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌重组菌株在形成营养细胞时能够分泌穿膜肽与鲤疱疹病毒II（CyHV-2）囊膜蛋白ORF81形成的融合蛋白。
6.如权利要求1所述的鲫鱼出血病生物防治方法，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌重组菌株的染色体上还重组整合有由枯草芽孢杆菌p43启动子、分泌信号肽sacB基因、穿膜肽tat基因和鲤疱疹病毒II（CyHV-2）囊膜蛋白orf81基因相融合所获得的p43-sacB-tat-orf81融合基因片段（SEQ ID NO: 2），该p43-sacB-tat-orf81融合基因片段利用同源交换整合至枯草芽孢杆菌染色体的lacA基因位点，该枯草芽孢杆菌重组菌株在形成营养细胞时能够胞外分泌表达穿膜肽与鲤疱疹病毒II（CyHV-2）囊膜蛋白ORF81的融合蛋白。
7.如权利要求1所述的鲫鱼出血病生物防治方法，其特征在于：所述多价载体疫苗是以枯草芽孢杆菌芽孢形式添加到饲料中，以口服方式接种免疫。
8.保藏号为CCTCCNo：M2013029的枯草芽孢杆菌 HT5304（Bacillus subtilis HT5304）在鲫鱼养殖病害防治中的应用。
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