[发明专利]鲫鱼出血病生物防治方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于鲫鱼出血病免疫防治的鲫鱼出血病生物防治方法及应用，属于微生物学、免疫学和水产动物病害防治领域。 

背景技术

鲫鱼，属于鲤科，是我国主要养殖的大宗淡水鱼之一。然而在鲫鱼养殖过程中，不仅受到病毒的侵染威胁同时也面临环境中细菌性感染的潜在风险。目前在我国鲫鱼养殖过程的重大疫病风险主要来自于由鲤疱疹病毒II（CyHV-2）和气单胞菌（主要为嗜水气单胞菌）引发的鲫鱼出血病，这些病害给鲫鱼养殖业的健康发展带来了破坏性影响和严重经济损失。 

疱疹病毒性造血器官坏死病（herpesviral haematopoietic necrosis，HVHN）是鲫鱼的一种高致病性病毒病，最初对该病的病原定义为金鱼造血器官坏死病毒（goldfish haematopoietic necrosis virus，GFHNV），也有称作疱疹病毒性造血器官坏死病病毒（herpesviral haematopoietic necrosis virus，HVHNV）。该病原是第二个分离自鲤科鱼类的疱疹病毒，按照国际病毒系统分类委员会的系统命名规则，正式命名为鲤疱疹病毒II型（CyHV-2）。它与另外两个感染鲤科的病毒鲤疱疹病毒I型（CyHV-1）和鲤疱疹病毒III型（CyHV-3）在进化上有着较近的亲缘关系（Waltzek TB, et al. 2005. J Gen Virol 86:1659-1667）。目前对此三种病毒已建立起快速、准确的分子生物学诊断检测方法（Goodwin A.E.,et al.2006 Diseases of Aquatic Organisms 69, 137-143）。 

鲤疱疹病毒II型（CyHV-2）是直径为175~200 nm的二十面体，有囊膜包裹（Groff J M，et al.1998，J Vet Diagn Invest，1（04）：375-378）, 该病毒主要在水温18℃-25℃条件下致使鱼发病，发病鲫鱼具体症状表现为体表出血，尤其是鳃盖与腹部前部出血严重。由幼鱼到成鱼均有发生，是一种高传染性和死亡率较高的重大疫病。CyHV-2于1992年最先在日本被发现，之后在澳大利亚、美国和我国台湾地区相继有报道，由CyHV-2引发的死亡率可高达100%（Jung SJ et al.1995. J Fish Dis 18:211-220; Stephens FJ, et al.2004 Aust Vet J82:167-169；Waltzek T B et al. 2007. J Aquat Anim Health 21:60-67; Andor D et al. 2011. Magyar Allatorvosok Lapja 13:174-181）。2011在靠近捷克共和国易北河附近的湖泊中发现大量异育银鲫因感染CyHV-2而产生大面积的死亡（Daněk T, et al., 2012 Dis Aquat Organ 102(2):87-95）。2009年以来，该病毒在我国许多省市鲫鱼养殖地区相继引发大面积病害，给鲫鱼养殖业带来巨大冲击。 

嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）属于弧菌科、气单胞菌属，是一种常见的病原菌，属于革兰氏阴性菌，使两栖类、鱼类、爬行类及人类等多种动物受到感染，是一种人-兽-鱼共患病病原菌。嗜水气单胞菌可产生许多毒性很强的外毒素，一般水产动物感染嗜水气单胞菌之后常引发肝肾脏异变，症状为全身出血，该菌也是鱼类细菌性出血病的主要病原菌。此外在发病鲫鱼中也已分离纯化到嗜水气单胞菌，经回染实验证明鲫鱼出现出血症状（刘亚楠等，2012，水生态学杂志05期；陆文浩等，2009，广东海洋大学学报，第01期），在鲫鱼养殖过程中该病原常伴随病毒性病害同时发生，已开发的单效价疫苗往往难以奏效，给防治带来困难。 

综上所述，针对鲫鱼出血病这一重大疫病，构建一种高效、经济和应用便利并可同时抵御病毒和细菌性病原侵染的多效价生物防御体系是鲫鱼养殖业健康可持续发展的迫切生产需求。 

在水产养殖病害防治中，使用疫苗是一种较理想的预防方法，接种疫苗已经成为世界范围内水产养殖业发达国家和地区的生产养殖规范。而口服剂型疫苗因其相对注射接种和浸泡接种疫苗在水产养殖生产中更为便利和经济，不会给鱼类造成不必要的应激反应，是水产疫苗最为理想的疫苗产品形式。