[发明专利]一种甘油二酯激酶α基因-壳聚糖纳米粒在制备治疗过敏性哮喘药物中应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药制剂领域，特别涉及一种甘油二酯激酶α(DGKα)基因-壳聚糖纳米粒在制备治疗过敏性哮喘药物中应用。

背景技术

哮喘是一种慢性气道变态反应性炎症性疾病，CD4+T细胞的过度活化在哮喘的发病中具有重要作用。CD4+T细胞活化后向Th2细胞分化增多，Th2细胞的过度活化导致了Th2反应为主的免疫反应，Th2型细胞因子IL(白细胞介素)-4、IL-5和IL-13等分泌增多，最终导致嗜酸性粒细胞等炎症细胞在气道聚集，引起气道变态反应性炎症。研究表明，正常人反复接触过敏原后，过敏原的刺激不会导致抗原特异性T细胞过度活化而始动发病过程。而哮喘患者，气道抗原呈递细胞摄取和提呈过敏原给T细胞后，促使T细胞过度活化和增殖，始动哮喘的发生。因此免疫耐受机制的缺陷和障碍是哮喘的主要发病机制。诱导机体对抗原特异性免疫耐受目前已成为防治哮喘的新途径。

近年来许多研究发现，DGK(甘油二酯激酶)在调节免疫细胞的免疫功能中起重要作用。甘油二酯和磷脂酸是重要第二信使，可直接或者分解为各种信号后参与多种免疫细胞的信号传导。DGK能使甘油二酯磷酸化生成磷脂酸，调节甘油二酯和磷酸脂的平衡，在调节免疫功能中起重要作用。DGKα(甘油二酯激酶α)是DGK的一个亚型，为I型DGK，T细胞高度表达DGKα。

T细胞无能是外周免疫耐受主要机制之一。T细胞无能是指T细胞的功能性无反应或者失活。无能T细胞不能分泌IL-2，不能增殖。Zha等[Zha Y，Marks R，Ho AW，et al.T cell anergy is reversed by active Ras and is regulated by diacylglycerol kinase-a.Nat Immunol.2006；7(11)：1166-1173.]研究组发现无能T细胞过度表达DGKα，表达量为正常静息T细胞5～10倍。Sanjuan等[Sanjuan MA，Jones DR，Izquierdo M，et al.Role of diacylglycerol kinase alpha in the attenuation of receptor signaling.J Cell Biol.2001：153，207-220.Sanjuan MA，Pradet-Balade B，Jones DR，et al.T cell activation in vivo targets diacylglycerol kinase to the membrane：a novel mechanism for Ras attenuation.J Immunol，2003，170：2877-2883.]研究发现转染DGKα基因的T细胞过度表达DGKα，抑制甘油二酯依赖的T细胞受体(TCR)信号，从而减弱Ras激活信号和抑制ERK磷酸化，抑制了IL-2启动子的活性，减弱T细胞活化信号CD69表达，导致T细胞无能。Olenchock等[Olenchock BA，Guo R，Carpenter JH，et al.Disruption of diacylglycerol metabolism impairs the induction of T cell anergy.Nat Immunol.2006；7(11)：1174-1181.]研究发现DGKα缺陷的T细胞在诱导T细胞无能的条件下仍能增殖并分泌IL-2，RAS活性、ERK磷酸化等细胞增殖信号表达增强。因此，DGKα能将甘油二酯磷酸化为磷脂酸，抑制甘油二酯介导的TCR信号活化，抑制T细胞过度活化，诱导T细胞无能，在T细胞免疫耐受中起重要作用。DNA疫苗是治疗哮喘的常用方法，DGKα基因的DNA疫苗是否可通过诱导免疫耐受治疗哮喘尚不清楚。