[发明专利]一种检测林可霉素的方法及其专用试纸

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测林可霉素的方法及其专用试纸。

背景技术

林可霉素具有抗菌和消炎作用，不法分子常在祛痘化妆品中擅自添加，从而达到快速有效消除痘痘、粉刺、痤疮的目的，但长期使用会刺激皮肤，还会引起肾功能障碍和革兰氏阳性菌的耐药性增加，给人体健康造成严重危害。

目前，祛痘化妆品中非法添加林可霉素的检验方法，类似研究多为仪器分析方法，检测成本高、时间长，且需要多种化学试剂和专业的检测人员，不适宜简易条件下的快速检测。因此针对高科技、高智能制售假劣化妆品案件给化妆品监管工作带来的新挑战，有必要建立简便易行的林可霉素的检测方法。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种检测林可霉素的试纸。

本发明所提供的检测林可霉素的试纸，包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜和吸水垫，其依次连接；所述结合物释放垫上包被有胶体金标记的林可霉素特异性抗体；林可霉素特异性抗体可为林可霉素多克隆抗体或林可霉素单克隆抗体；反应膜上包被有检测区和质控区；当林可霉素特异性抗体为林可霉素多克隆抗体时，检测区包被林可霉素半抗原-载体蛋白偶联物，质控区包被羊抗兔抗抗体；当林可霉素特异性抗体为林可霉素单克隆抗体时，检测区包被林可霉素半抗原-载体蛋白偶联物，质控区包被羊抗鼠抗抗体；所述半抗原如下（图5）：

其中，所述结合物释放垫中有1/3-1/2区域被所述样品吸收垫覆盖。

所述反应膜包被有检测区和质控区，其中所述的检测区位于近于所述结合物释放垫的末端的一侧，所述质控区位于远离所述结合物释放垫的末端的一侧；所述检测区距所述结合物释放垫的末端5-8mm，优选为6mm；所述质控区距所述检测区4-7mm，优选为5mm。

所述检测区和所述质控区均为与所述试纸条的长相垂直的条带状。

所述结合物释放垫包被胶体金标记的林可霉素单克隆抗体，其包被密度为0.1-0.2μg/cm²，优选0.1μg/cm²。

所述林可霉素单克隆抗体为由保藏号为CGMCC No.6508的林可霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株F-1-4分泌产生的抗体；所述抗抗体可为羊抗鼠IgG；所述载体蛋白可为卵血清蛋白、人血清白蛋白、牛血清白蛋白、血蓝蛋白或甲状腺蛋白等。

所述试纸中包括底板，所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜和吸水垫黏贴在所述底板上。

所述试纸具体可为条状；为了便于使用，所述条状的试纸可以覆盖有保护膜或装在盒内。

所述保护膜可以覆盖所述试纸的两端（样品吸收垫、结合物释放垫和吸水垫）

所述盒由底座和盖构成，底坐和盖通过卡齿和卡孔相连接；所述底座上有与所述盖连接的卡齿和与所述试纸相匹配的凹槽；所述盖上有加样孔、观察窗和与底座卡齿相配的卡孔，所述加样孔的位置与所述样品吸收垫的位置相对应，所述观察窗与所述反应膜上的检测区和质控区相对应；所述试纸位于所述凹槽内；所述观察窗上印有T和C，T表示检测线，在靠近所述加样孔侧，C表示质控线，在远离所述加样孔侧。

底板可由不吸水的韧性材料制成，如硬质塑料、不吸水硬纸，具体可为PVC板材；样品吸收垫可由玻璃纤维棉、聚酯材料（聚酯丝或聚酯棉）、尼龙膜、聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜制成；结合物释放垫可由玻璃纤维制成；吸水垫可为吸滤纸或虑油纸；反应膜可为硝酸纤维素膜或为纯纤维素膜；所述保护膜可为PE材质的保护膜。

本发明的另一个目的是提供一种制备上述试纸的方法。

本发明所提供的制备上述试纸的方法，是将样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜和吸水垫依次连接；所述结合物释放垫上包被有胶体金标记的林可霉素特异性抗体；所述林可霉素特异性抗体为林可霉素多克隆抗体或林可霉素单克隆抗体；所述反应膜上包括检测区和质控区，检测区包被有半抗原和载体蛋白的偶联物，质控区包被有抗抗体；

所述样品吸收垫在进行所述连接前，先在如下溶液中浸泡1-3h，再进行干燥：含0.3-0.5%（体积百分含量）牛血清蛋白、pH值为9.6-10.0、0.1-0.2mol/L的碳酸盐缓冲液；

所述包被有胶体金标记的林可霉素特异性抗体的结合物释放垫是按照如下方法制备的：将包被前的结合物释放垫先在如下溶液中浸泡20-40秒，干燥，再进行所述胶体金标记的林可霉素特异性抗体包被：含有0.8-1.2％（体积百分含量）牛血清白蛋白、pH值为7.0-7.4、0.1-0.2mol/L磷酸缓冲液。

本发明的另一个目的是提供一种检测林可霉素的方法。