[发明专利]一种快速提取荷花花瓣总RNA的方法

权利要求书

1.一种快速提取荷花花瓣总RNA的方法，其特征在于包括下列步骤：

①称取0.2g荷花花瓣于液氮预冷的研钵中迅速充分地研磨成粉末状；

②将粉末状样品转入-1.5mL RNase free的离心管中，加入1mL 65^oC预热的细胞裂解液，混匀后继续65^oC温育10min，期间摇匀2～3次； 

③加入300μL的乙酸钾溶液，上下温和颠倒混匀15～20次，室温静置3～5min；

④4^oC，12000rpm，离心5min，取上清于一新的离心管中；

⑤加入300μL氯仿：异戊醇=24：1，震荡15s，4^oC，12000rpm，离心30s使分层，取上层水相于一新的离心管中，重复此步骤1～2次；

⑥加入与上层水相等体积的-20^oC预冷的异丙醇，置于-20^oC冰箱30min；

⑦在4^oC、12000rpm的条件下，离心5min使RNA沉淀；

⑧移去上清，用1mL的-20 ^oC预冷的75%乙醇洗涤沉淀两次，在超净工作台内吹干后，加入10～20μL的焦炭酸二乙酯处理水溶解RNA，于-80 ^oC保存；

    所述的1升细胞裂解液中含有下列组分：

十二烷基硫酸钠                        40克

三羟甲基氨基甲烷盐酸盐                200毫摩尔

乙二胺四乙酸　　　　　　　　　　　　　0.5毫摩尔

聚乙烯吡咯烷酮　　　　　　　　　　　　20克

β-巯基乙醇　　　　　　　　　　　　　 10毫升

其它为焦炭酸二乙酯处理水。