[发明专利]急性B淋巴细胞白血病启动细胞特性测定系统及方法

说明书

技术领域

本发明属于细胞表型的检测设备和操作工艺，具体涉及确定急性B淋巴细胞白血病启动细胞特性的专用设备和方法。

背景技术

流式细胞仪分析法已成为评估的免疫表型特征的首选方法。重要的待染色剂的单克隆免疫抗原已经商品化、可选品种繁多。免疫表型技术已经为基础理论研究提供了有力的工具。

急性淋巴细胞白血病（Acute lymphoblastic leukemia 缩写ALL）是造血系统的恶性肿瘤，以未成熟淋巴系统的恶性增生及免疫紊乱为特征。在过去十多年，尽管对ALL的诊断和治疗有了显著的进展，较大比例的患者可以完全缓解（Complete Remission缩写CR），但大部分CR后的患者终将复发而死亡，导致ALL患者的长期无病生存率（Disease-Free Survival缩写DFS）仍相当低。因此，积极探索易于检测并且特异性表达的新标记用于ALL复发预测，将会使更多的ALL患者得到更加具有针对性的临床治疗，因此对于进一步提高DFS有着重大意义。

越来越多的实验证据表明白血病干细胞（leukemia stem cells缩写LSCs）是白血病启动、复发与耐药的根源。那些能够在免疫缺陷小鼠体内长期重建白血病并且具有自我更新能力的细胞称为白血病启动细胞（leukemia initiating cells缩写LICs），基本等同于LSCs。在前期工作中，利用新生期NOD/SCID/IL2rγnull小鼠异种移植模型首次鉴定出CD34⁺CD19⁺细胞为急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患者的LICs。但是，为了将B-ALL患者的LICs与正常B祖细胞鉴定开来，必须进行的LICs表面标记实验分析报告是目前检验医学的尖端课题。而且，在表型标记实验中对准备工作的精准程度，对操作技术工艺步骤的要求是极其苛刻的，对于专业研究人员来讲也是具有非常大的难度。目前，此类疾病的对于人类生命健康威胁已经是越来越严重。科学研究阶段的成果，必须竟快的转化为现代化的工程技术手段，包括使用定量定性的试剂、标准智能化的专用设备、严格的操作规范，以完善B-ALL患者在初诊阶段的病理检查，包括对B淋巴细胞白血病启动细胞特性的实验定性、定量分析的规范化、标准化。以有利于对患者能采取更加有效的临床治疗方案、尽可能的提高B-ALL患者的DFS。

发明内容

本发明的目的，在于为使B-ALL患者在就诊初期就快速、准确地确定出LICS的特异性，根据国家自然科学基金青年基金项目“白血病启动细胞在急性B淋巴细胞白血病复发预测”最新理论研究的成果，创新设计一种急性B淋巴细胞白血病启动细胞特性专用设备，其中包括规范化的操作方法和适用试剂。使具备设备基础和经过专门培训的医师能够方便地作出LICs表面标记实验分析报告，为广大的急性B淋巴细胞白血病患者作出贡献。具体的设计方案如下：

专用设备是“急性B淋巴细胞白血病启动细胞特性测定系统”，系统结构中包括流式细胞仪及其数据分析软件。关键设计在于系统中还包括主控计算机单元，以及连接在主控计算机单元配套接口上的存储有主控程序的系统管理模块、配置缓存器的监、控显示器、存储有标准数据和图形的经验数据模块、暂存器模块、设置在系统操控台上的的操控面板、存储有内、外数据通讯协议和数据规格转换模式的通讯模块、打印机及接口电路，流式细胞仪通过通讯接口电路和主控计算机的数据总线连接、流式细胞仪结构中配套有对标本进行激光扫描采样的测试窗口、专用标本试管以及专用试剂盒。

本发明的关键技术在于借助主控计算机系统的完善配备和针对性任务明确的控制方法与配套软、硬件的配套，将关键的采样设备-流式细胞仪改造成为LICs表面标记实验分析报告专用的系统装备。流式细胞仪的用途是先把细胞用各种荧光的方法标记，抗体标记表面抗原。然后把标记好的细胞用流式细胞仪检测，以激光扫描采集采集样本反馈信号的强弱，记录下所需要的数据。但是，最终要还是由医务人员来判断是不是肿瘤细胞，什么样的肿瘤细胞；流式细胞仪检测中仅仅能完成的是基础数据的收集。比较先进的厂家在流式细胞仪中还附带了数据分析软件，可以对基础数据进行分类以及整理出按照设定条件下的色标二维点图，为分类、定性分析打下基础。但是，被测定细胞特异性内涵的定性和进一步定量分析，流式细胞仪和分析软件是无能为力的。特定任务的的实现，取决于染色标记的选配是否合理，定标界限选取值实验是否的具有普遍性和操作方法是否能为临床的结果所验证。