[发明专利]一种群勃龙残留快速检测试纸卡及其制备方法

权利要求书

1.一种群勃龙残留快速检测试纸卡，其特征在于：所述的群勃龙残留快速检测试纸卡包括塑料盒体和封装于塑料盒体内的试纸条，所述试纸条的底层为支撑层，该支撑层上由左到右依次附着有紧密相连的样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述的塑料盒体上开有加样孔和观察窗，该加样孔的位置与试纸条上的样品垫位置相对应，观察窗与试纸条上的硝酸纤维素膜位置相对应，所述的硝酸纤维素膜上有群勃龙－鸡卵清白蛋白偶联物溶液印制的检测线和羊抗鼠IgG溶液印制的质控线，所述的金标抗体结合垫上灌注有胶体金标记的抗群勃龙特异性单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的群勃龙残留快速检测试纸卡，其特征在于：所述的支撑层是PVC板。

3. 根据权利要求1所述的群勃龙残留快速检测试纸卡，其特征在于：所述的胶体金标记的抗群勃龙特异性单克隆抗体是由群勃龙－牛血清白蛋白偶联物免疫Balb/C小鼠制备而来的。

4. 一种权利要求1所述的群勃龙残留快速检测试纸卡，其特征在于：首先将样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫按照由左到右的顺序附着于支撑层上，所述的硝酸纤维素膜上有群勃龙－鸡卵清白蛋白偶联物溶液印制的检测线和羊抗鼠IgG溶液印制的质控线，然后用切割机制成试纸条，再将试纸条封装于带有加样孔和观察窗的塑料盒体内，即制得群勃龙残留快速检测试纸卡。

5. 根据权利要求4所述的群勃龙残留快速检测试纸卡的制备方法，其特征在于所述的样品垫的制备方法为：将玻璃纤维棉用含有质量浓度为2% 的BSA、质量浓度为1%的蔗糖、质量浓度为0.5% 的硼酸钠和质量浓度为0.1%的 NaN₃的磷酸盐缓冲溶液处理后，干燥备用，即为样品垫。

6. 根据权利要求4所述的群勃龙残留快速检测试纸卡的制备方法，其特征在于所述的金标抗体结合垫的制备方法为：将玻璃纤维棉裁成4 mm宽的细条，放入含有质量浓度为5% 的BSA、质量浓度为2%的蔗糖、质量浓度为0.8% 的NaCl和质量浓度为0.05% 的NaN₃的磷酸盐缓冲溶液中20 min，37 ℃恒温烘干，然后将金标抗体灌注于已处理好的玻璃纤维棉上，真空冻干4 h，即为金标抗体结合垫。

7. 根据权利要求4所述的群勃龙残留快速检测试纸卡的制备方法，其特征在于所述的硝酸纤维素膜的制备方法为：将硝酸纤维素膜置于X-only单向喷点仪平台上，检测抗原放于A池，RaMIgG放于B池，展平压紧，开机后将抗原和二抗分别点射于硝酸纤维素膜上，形成检测线和质控线，室温自然干燥后，将其浸入BSA质量浓度为1%的磷酸盐缓冲溶液，pH值为7.4的封闭液中30 min，37 ℃烘干后，加入干燥剂，4 ℃密封保存。

8. 根据权利要求4所述的群勃龙残留快速检测试纸卡的制备方法，其特征在于所述的群勃龙－鸡卵清白蛋白偶联物的制备方法为：称取群勃龙 100 mg和琥珀酸酐180 mg，溶于10 ml无水吡啶，50 ℃避光搅拌反应24 h，反应产物用氮吹仪浓缩，获得淡黄色膏状物；用质量浓度为5% 的NaHCO₃溶液溶解后，乙醚萃取，H₂SO₄酸化，离心后弃上清，残余物用无水硫酸钠干燥，重结晶得群勃龙琥珀酸酯；混合酸酐法将37.2 mg 群勃龙琥珀酸酯溶解在2 ml N,N-二甲基甲酰胺中，置4℃冰箱中预冷10 min，然后于冰浴磁力搅拌下，加入10 μl三乙胺，4 ℃冰浴条件下反应1 h，再加入30 μl氯甲酸异丁酯，继续冰浴搅拌反应1 h；将40 mg的鸡卵清白蛋白溶于2 ml、摩尔浓度为0.05 mol/L、pH=9.6的碳酸盐缓冲溶液中，冰浴、搅拌条件下将上述反应产物逐滴加入鸡卵清白蛋白溶液中，加完后在4 ℃下振荡反应6 h，反应产物充分透析，即得群勃龙－鸡卵清白蛋白检测抗原溶液，将其冷冻干燥保存备用。

9. 根据权利要求4所述的群勃龙残留快速检测试纸卡的制备方法，其特征在于所述的吸收垫的制备方法为：将以植物长纤维为原材料制作的纯白滤纸用切割机切成4 mm宽的细条，并用胶膜进行一侧封闭，干燥备用，即为吸收垫。